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同源重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化
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| 最近同源重組了一個質(zhì)粒,加上我的目的片段質(zhì)粒大概50kb,比較大。接下來想把它轉(zhuǎn)到ET12567中做結(jié)合轉(zhuǎn)移,總是失敗,不長菌。為了驗證,還把該質(zhì)粒轉(zhuǎn)到了Top10 中,也轉(zhuǎn)失敗。應(yīng)該是質(zhì)粒的問題。但是該重組質(zhì)粒pcr驗證過有kan抗性,而且在液體kan培養(yǎng)基生長良好。。。求高手指點,轉(zhuǎn)化失敗,質(zhì)粒本身可能會有什么問題呢? 謝謝 |
新蟲 (初入文壇)
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