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凱倫愛(ài)佳佳金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
雙熒光酶素實(shí)驗(yàn)，奇怪結(jié)果��？!? 已有2人參與
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其實(shí)做的是一個(gè)驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，如下： promega的NF-kB啟動(dòng)子質(zhì)粒，轉(zhuǎn)化測(cè)序后沒(méi)問(wèn)題，提取無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒。 人類(lèi)TLR3基因擴(kuò)增，克隆進(jìn)p3X-flag載體，測(cè)序無(wú)誤，提無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒。 HEK293前一天晚上種24孔板，第二天70-80%匯合度lipo2000轉(zhuǎn)染，TLR3：NF-kB：pRL-TK=10:10:1，6小時(shí)后換生長(zhǎng)液。 24小時(shí)后用polyIC濃度梯度刺激12h，后測(cè)雙熒光。 結(jié)果螢火蟲(chóng)熒光值均在80左右，海參熒光隨著刺激濃度增加而增加百倍以上，700、1700，3000這個(gè)樣子的。 不知道為什么會(huì)出現(xiàn)這種情況，反應(yīng)液和終止液都是分裝好保存的。@hc-material@gyesang |
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2樓2018-07-31 19:45:06
PumbbaP
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3樓2018-08-31 12:19:08
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4樓2018-08-31 18:17:11
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1.轉(zhuǎn)染效率低。我們平時(shí)都是10的4次方。2.底物1和2用的量少。3.polyic未刺激起來(lái)。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
5樓2019-04-29 12:20:11
junjieshao
禁蟲(chóng) (小有名氣)
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6樓2019-04-29 22:29:06
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