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summerdayl新蟲 (初入文壇)
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[交流]
農(nóng)桿菌侵染油菜，放進(jìn)篩選培養(yǎng)基還有農(nóng)桿菌菌落 已有2人參與
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 想求助一下，為什么放進(jìn)篩選培養(yǎng)基了還有農(nóng)桿菌菌落長(zhǎng)出來，有Carbencillin（500mg/L）和Hygromycin（25mg/L）兩種抗生素了，前者是殺死農(nóng)桿菌，后者是殺死未轉(zhuǎn)化植物，植株沒有一顆有要死掉的跡象，但是查文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)別人做的相同植物相同質(zhì)粒用的兩種抗生素的濃度并不低了。怎么辦啊，著急。。。 |
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顯然你這抗生素 或者添加方法有問題啊~~~農(nóng)桿菌沒有殺死完吧 還有可能，，，但是你這所有的植株都是Hygromycin抗性植株那就有點(diǎn)不可思議了，你這個(gè)轉(zhuǎn)化效率也忒高了點(diǎn)~~~ 建議做實(shí)驗(yàn)要多設(shè)置對(duì)照組。（設(shè)置一個(gè)只有農(nóng)桿菌的組，驗(yàn)證下你的Carbencillin有沒有問題，再設(shè)置一個(gè)未轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌的正常植物組，看看你的Hygromycin這個(gè)有沒有問題） 祝試驗(yàn)順利~ |
2樓2018-05-17 10:14:42
summerdayl
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3樓2018-05-24 05:49:36
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推薦一種抗生素，特美汀。抑制農(nóng)桿菌效果還不錯(cuò)。另外hyb可以試試40mg/l�；蛘吣托牡却�，有時(shí)候篩選沒那么快。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2018-05-30 10:39:16
summerdayl
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5樓2018-06-06 11:26:44
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侵染濃度只要不是太高也沒事，一，侵染后用無菌濾紙一定要吸干表面菌液。二，共培養(yǎng)不要等菌長(zhǎng)的太多再洗然后轉(zhuǎn)到篩選培養(yǎng)基上，看著有淡淡的菌斑就開始了。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2018-06-13 18:09:05
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7樓2018-07-20 13:06:21
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