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321wangke321金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
ccdB載體構(gòu)建 已有2人參與
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請(qǐng)問(wèn)ccdB序列有開(kāi)放閱讀框有306bp，構(gòu)建有效ccdb載體還需要引入多余的序列嗎？有文獻(xiàn)用的ccdb長(zhǎng)達(dá)700多，哪位能告知是怎么回事？ 另外誰(shuí)有含有ccdb的質(zhì)粒，可以交換或者有償。謝謝了。急著畢業(yè)～ 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
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kangaroo0513
新蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- MolEPI: 1
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- 金幣: 2277.4
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- 蟲(chóng)號(hào): 2621902
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- 專業(yè): 細(xì)胞物質(zhì)運(yùn)輸
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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一般ccdB基因是用于殺原核細(xì)胞的，因此需要前面有原核啟動(dòng)子，達(dá)到降低插入目的片段后的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化背景的目的。另外，為了（1）避免該質(zhì)粒自身重組丟失ccdB部分（2）增加選擇標(biāo)記，一般還會(huì)在ccdB前加一個(gè)氯霉素抗性標(biāo)記CmR，用于細(xì)菌中更有效擴(kuò)增篩選。 我們有含有整個(gè)表達(dá)框（啟動(dòng)子-CmR-ccdB）的載體，有需要的話可以站短。后面再連入自己的基因的時(shí)候，可以把整個(gè)表達(dá)框切除，換行你的gene。 |
3樓2018-05-23 11:20:02
donkey2014
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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- 專業(yè): 生物化學(xué)
2樓2018-05-23 08:29:32
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