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lren_87鐵桿木蟲(chóng) (正式寫手)
傻子樂(lè)
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[求助]
TA克隆，驗(yàn)證總不對(duì) 已有1人參與
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非常簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)，耽誤了很久，一直都不對(duì)。 細(xì)菌16S片段，插入pMD-18t載體，連接轉(zhuǎn)化完了后凃平板，挑取單菌落進(jìn)行PCR驗(yàn)證，用的M13F和M13R的引物驗(yàn)證，要么PCR驗(yàn)證失敗，要么PCR結(jié)果出現(xiàn)1-2條帶，都非常亮，但是都大于2000bp，實(shí)際M13F和M13R間的序列+16S的序列應(yīng)該是在1700bp左右。 后來(lái)直接把重組質(zhì)粒提取出來(lái)，然后送測(cè)序，結(jié)果全部都不成功，測(cè)了10多次，要么套峰，要么直接信號(hào)弱。 這個(gè)問(wèn)題怎么破？？？這么簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)，耽誤了幾個(gè)月了，求大佬伸出援手。 |
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2樓2018-06-30 12:27:53
lren_87
鐵桿木蟲(chóng) (正式寫手)
傻子樂(lè)
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3樓2018-06-30 12:35:47
4樓2018-07-01 13:27:51
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