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xyy1993捐助貴賓 (初入文壇)
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有關(guān)實(shí)驗(yàn)室純培養(yǎng)后測(cè)量細(xì)菌數(shù)量的問(wèn)題 已有2人參與
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實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菧y(cè)試新儀器探測(cè)Ecoli的時(shí)間跟精準(zhǔn)度，然后導(dǎo)師需要我做的是一個(gè)類(lèi)似于平行實(shí)驗(yàn)以確定機(jī)器對(duì)大腸桿菌測(cè)量數(shù)據(jù)的精準(zhǔn)性。機(jī)器操作十分簡(jiǎn)單，就是用磷酸緩沖液對(duì)高濃度細(xì)菌進(jìn)行稀釋后放入機(jī)器即可。但對(duì)于傳統(tǒng)的技術(shù)方法，即同時(shí)使用平板基數(shù)跟OD值的測(cè)量，這兩種方法是如何結(jié)合起來(lái)的？為什么OD值的測(cè)量就是取1mL的高濃度細(xì)菌加入液體培養(yǎng)基，在充分混合后首先測(cè)量空白組（即只有液體培養(yǎng)基）的OD值，再測(cè)量混合了1ml細(xì)菌的培養(yǎng)基OD值并將其放入37度恒溫震蕩混合器中培養(yǎng)，每隔一個(gè)小時(shí)取樣并使用儀器測(cè)其od值，這樣做的意義是什么？24H之后還需要進(jìn)行什么進(jìn)一步操作嗎？與此同時(shí)，在含有1mL的液體培養(yǎng)基制備好之后，立即取1mL混合液在48孔板上進(jìn)行系列的十倍稀釋?zhuān)瑸楹未藭r(shí)濃度就是從10的負(fù)一次方開(kāi)始了？而且就算最后平板計(jì)數(shù)算出了數(shù)量，怎么和OD的方法進(jìn)行統(tǒng)一？ 可能我說(shuō)的東西比較碎片，希望有大神幫我整理一下，給我提供一個(gè)清晰的思路，謝謝 跪求  |
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簡(jiǎn)單點(diǎn)說(shuō)就是用最常用的平皿法和儀器對(duì)比，看看儀器準(zhǔn)確度如何 儀器檢測(cè)菌液可以不用稀釋?zhuān)跍y(cè)完空白溶液的OD值后測(cè)試菌液的OD值，目的是消除溶液的誤差，此時(shí)會(huì)有一個(gè)數(shù)值，在此數(shù)值下在儀器測(cè)試，同時(shí)對(duì)此濃度下的菌液10倍的梯度稀釋?zhuān)褂闷矫蠓ㄟM(jìn)行培養(yǎng)，根據(jù)稀釋濃度反推菌液濃度，得到的數(shù)值與儀器測(cè)量值比對(duì)，以檢查準(zhǔn)確度、精密度、重現(xiàn)性、檢測(cè)限等等 至于24小時(shí)后，OD值可能變化就不大了，可以根據(jù)菌培養(yǎng)的生長(zhǎng)曲線，自定義一個(gè)檢測(cè)時(shí)間，在生長(zhǎng)期可以將取樣次數(shù)加密 10的負(fù)一次方，就是將菌液稀釋10倍，負(fù)二次方就是稀釋100倍，以此類(lèi)推 |
2樓2018-07-05 11:17:41
xyy1993
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所以就是說(shuō)用od值進(jìn)行生長(zhǎng)曲線的測(cè)定應(yīng)該是我在用24h培養(yǎng)我需要的菌液時(shí)進(jìn)行的是嗎？就說(shuō)這個(gè)應(yīng)該是一個(gè)最最開(kāi)始的步驟嗎？那他的目的又是什么呢？謝謝 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶(hù)端 |
3樓2018-07-05 14:01:48
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根據(jù)你的描述每隔一小時(shí)取樣測(cè)OD，推測(cè)應(yīng)該是測(cè)菌的生長(zhǎng)曲線，應(yīng)該是你把菌加入到培養(yǎng)基之后，開(kāi)始測(cè)0點(diǎn)的OD值，同時(shí)測(cè)空白培養(yǎng)基的OD值(這個(gè)應(yīng)該是0或很小的值，忽略不計(jì)的)，然后每小時(shí)或半小時(shí)一次取樣測(cè)試，同時(shí)做平皿法確認(rèn)一下，24小時(shí)之后，也許用不上24小時(shí)，OD值就沒(méi)什么變化了，因?yàn)榫刻嗵嗔�，死菌活菌混雜在一起測(cè)沒(méi)有什么意義，我的理解是這樣，或者你還需要做一下染色看看死菌活菌的比例 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
4樓2018-07-08 13:32:49
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6樓2020-07-14 20:52:49
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