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開始我的表演鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
如何用DMSO溶解抑制劑
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本人新手，最近要做細(xì)胞試驗(yàn)，需要用到抑制劑，但是現(xiàn)在遇到了一些問(wèn)題，請(qǐng)各位老師或者大神指教。 因?yàn)楸疽种苿┱f(shuō)明書標(biāo)明需要用DMSO溶解，上網(wǎng)查了下，0.1%的DMSO對(duì)細(xì)胞沒(méi)有顯著影響�，F(xiàn)在手里有10mg的NPS2143抑制劑，說(shuō)明書標(biāo)明：稀釋成5mM需要DMSO4.8909ml�，F(xiàn)在做試驗(yàn)需要抑制劑濃度5mM，請(qǐng)問(wèn)完全配制需要多少DMSO，又需要多少培養(yǎng)液？ 下面是小弟算的，但是總覺(jué)得有點(diǎn)問(wèn)題： 5mM抑制劑需要4.8909ml DMSO； 因?yàn)榕囵B(yǎng)液里面的DMSO濃度需為0.1%，所以體積DMSO：培養(yǎng)液=1:1000； 先將抑制劑濃度擴(kuò)大1000倍，即為5000mM的濃度，DMSO即為4.8909ul; 根據(jù)DMSO：培養(yǎng)液=1:1000，培養(yǎng)液需要4.8909ml，也就是說(shuō)，先用DMSO4.8909ul溶解抑制劑，再將DMSO溶解后的溶液加入到4.8909ml的培養(yǎng)基中。最終濃度即為5mM 但是有個(gè)問(wèn)題，小弟做的是6孔板，1孔需要2ml的培養(yǎng)液，如果按照這樣算的話，10mg的抑制劑小弟只能加2個(gè)孔，這太不可思議了吧。小弟到底算的是對(duì)還是錯(cuò)啊，10mg抑制劑好幾千呢，一個(gè)處理至少得6個(gè)孔吧，總覺(jué)得自己算錯(cuò)了。 |
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原來(lái)，是這樣
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你看錯(cuò)了吧，一個(gè)抑制劑需要5mM的濃度去做實(shí)驗(yàn)？如果是，你算的就沒(méi)錯(cuò)，想要做下去可以換96孔板，100ul體系可以多做一些孔。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2018-07-21 16:30:29
開始我的表演
鐵蟲 (小有名氣)
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3樓2018-07-22 09:20:55
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4樓2018-07-22 09:28:31
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