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熒光探針在熒光定量PCR技術中的應用
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今天介紹一下熒光探針在熒光定量PCR中的應用，相信大家都對熒光定量PCR或多或少了解一些，在這里，如果你知道了，不妨讓我們重新來學習一下吧。 首先我們先來了解一下什么是熒光定量PCR，簡單的說，它是一種實時監(jiān)控核酸擴增的技術，也就是我們在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號的變化對PCR過程進行實時監(jiān)控，以此實現(xiàn)對初始模板的定量分析。 熒光定量PCR本身就是產物的放大反應，它是在普通PCR的基礎上加上了熒光染料或者探針，在擴增過程中，熒光信號就會隨著PCR產物的增加而增強，通過對熒光強度的檢測，從而到達對初始模板量進行定量檢測。 實時熒光定量 PCR 的化學原理包括熒光染料和熒光探針兩種：1、熒光染料的作用機制主要為染料能夠與雙鏈DNA小溝結合，當PCR擴增時，隨著目的基因的增加，結合的熒光染料也逐漸增多，通過對熒光信號的收據對初始模板進行檢測，雖然熒光染料經濟方便，但也有其很大的缺點，只要是雙鏈DNA都能結合發(fā)光，特異性不強，這也是不常作為微量模板檢測的原因，例如病原體的檢測。2、探針類是除了引物外另外設置的一個探針，在它的兩端分別帶上發(fā)光基團和淬滅基團，這個時候，兩個平衡不發(fā)光，但當DNA通過引物被合成的時候，探針被折斷，釋放出發(fā)光基團和淬滅基團，兩個距離較遠，發(fā)光基團產生熒光，被機器收集，從而達到檢測模板量。 一道生物科技在探針修飾方面有著最高端的技術平臺和優(yōu)秀的團隊，探針修飾類型上百種，應用范圍也很廣，其中雙標探針修飾類型居多，如果你還在為探針設計和修飾煩惱，來一道，總有一款適合你。 |
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