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bio-boy鐵桿木蟲 (著名寫手)
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[求助]
大腸桿菌發(fā)酵表達(dá)的酶，沒有酶活是什么原因呢？ 已有2人參與
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| 如題，用大腸桿菌發(fā)酵表達(dá)精氨酸脫羧酶，結(jié)果顯示該酶轉(zhuǎn)化底物的活性很低，是什么原因呢？抗生素加了，誘導(dǎo)劑也加了。不知道是否需要破壁，但是破壁后，效果也不是很好。還能有什么原因呢？ |
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 大腸桿菌工程菌發(fā)酵 |
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2樓2018-08-28 09:50:00
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【答案】應(yīng)助回帖
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大腸桿菌發(fā)酵表達(dá)精氨酸脫羧酶 1.先看一下文獻(xiàn)報道的這個酶的活性高不高，并且酶活高的文獻(xiàn)多不多，不高的話，并且文獻(xiàn)少的話就正常。 2.再確認(rèn)編碼序列正確，序列設(shè)計合理的情況下，看一下蛋白表達(dá)，上清蛋白表達(dá)是否較多 3.酶的轉(zhuǎn)化需要一個合適的轉(zhuǎn)化條件，并且優(yōu)化，轉(zhuǎn)化條件是否合適。 |
3樓2018-08-28 22:44:43
bio-boy
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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4樓2018-08-31 12:04:02
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5樓2018-10-07 21:07:17
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