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提取真菌中的DNA
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最近在提霉菌的DNA，然后我的步驟是用無菌水洗培養(yǎng)皿上培養(yǎng)好的霉菌，離心去上清（4℃，12000r/min,15min），將沉淀用1mL的DNA提取液溶解，65℃水浴1h30min(每隔10min進行搖晃），然后加入60uL 20mg/mL溶菌酶，37℃稍微水浴，再加入10uL蛋白酶k和10uLRNA酶，37℃水浴30min（每隔10min進行搖晃），離心取上清（4℃，12000r/min，5min），加入1/2上清液體積的Tris平衡酚，以及和上清液等體積的酚：氯仿：異戊醇（25:24:1）混勻，離心（4℃，12000r/min，5min），取上清，加入等體積的氯仿：異戊醇（24：1），混勻，離心，取上清加2.5倍體積的無水乙醇，混勻，-20℃放置過夜，離心取上清，加入400uL75%乙醇，吹干，用水溶解。 現(xiàn)在問題出在加了無水乙醇之后，我放在-20℃過夜之后還是沒有沉淀，也沒有絮狀物，請問我是哪一步可能出了問題呢？ |
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