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我想早下班新蟲 (初入文壇)
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[交流]
請問大佬關(guān)于重組質(zhì)粒假陽性的問題 已有1人參與
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雙酶切法切質(zhì)粒和片段的，質(zhì)粒兩個(gè)酶切位點(diǎn)之間原本有連過片段，因此酶切后能夠看到一大一小兩個(gè)片段，大片段切膠回收，因此能保證質(zhì)粒是切開的。片段也是雙酶切，切膠回收。T4連接酶22度連接50分鐘，轉(zhuǎn)化bl21感受態(tài)細(xì)胞。長出來的菌落大概20個(gè)左右，挑8個(gè)菌做菌液PCR驗(yàn)證，只有兩個(gè)有條帶，其他都是假陽性。請問為什么會(huì)有這么高的假陽性率，是哪一步出了問題呢？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2019-04-15 22:43:20
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