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質(zhì)粒提取問(wèn)題
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我提取的土壤中抗生素抗性基因。以sul2基因?yàn)槔,提取的總DNAPCR后進(jìn)行了切膠純化,克隆,質(zhì)粒提取。得到的質(zhì)粒A260/280≥1.8。A260/230>2。純度是沒(méi)問(wèn)題了,但是濃度才30ng/ul。洗脫用的50ul滅菌水,質(zhì)粒DNA總量才1.5ug。但是說(shuō)明書上說(shuō)最少可以得到10ug質(zhì)粒DNA。我是取過(guò)夜培養(yǎng)的菌液1.5ml進(jìn)行質(zhì)粒提取的。用的也是高拷貝質(zhì)粒,不知道為什么洗脫DNA總量這么少?我想問(wèn)下這個(gè)濃度下的質(zhì)粒DNA能用來(lái)測(cè)序和制作qPCR的標(biāo)準(zhǔn)曲線嗎?求大神指教,謝謝 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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