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[求助]
紫外吸收法測(cè)酶活
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| 本人純化了一個(gè)重組酶，想測(cè)試是否有活性，按文獻(xiàn)中的方法測(cè)定235nm處的紫外吸收，但是我在用對(duì)照組標(biāo)零的時(shí)候吸光值一直在變，范圍還挺大的，之前用這臺(tái)分光光度計(jì)做蛋白濃度的標(biāo)曲是沒(méi)有問(wèn)題的（當(dāng)時(shí)用的595nm波長(zhǎng)），我的對(duì)照組是將酶煮沸5min滅活，再加底物，師姐說(shuō)可能蛋白變性了導(dǎo)致溶液不穩(wěn)定，我又把對(duì)照改成了只有底物，吸光度仍然無(wú)法標(biāo)零，但是當(dāng)我把波長(zhǎng)改為400nm，600nm的時(shí)候，標(biāo)零是沒(méi)有問(wèn)題的，這到底是為什么啊？？？為什么在可見(jiàn)光范圍內(nèi)就是穩(wěn)定的呢？實(shí)驗(yàn)室兩臺(tái)分光光度計(jì)我都試了，分光光度計(jì)是新世紀(jì)T9紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，希望能給點(diǎn)建議，謝謝大家 |
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2樓2018-12-26 21:51:36
熱鬧好呀
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小冀-: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2019-01-27 10:19:23
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會(huì)不會(huì)是底物不純的問(wèn)題啊？要不要試試只有酶的話是什么情況 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
3樓2019-01-26 22:55:36
4樓2019-04-16 23:51:31
下一頁(yè)、空白
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5樓2019-06-17 16:59:20
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