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木蟲阿哲新蟲 (小有名氣)
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[求助]
蛋白低背景銀染試的原理
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我們最近在做的是SDS-PAGE電泳，用的試劑盒是生工的低背景銀染試劑盒，但是試劑盒里只有實(shí)驗(yàn)步驟，想知道低背景銀染的原理，百度不到太清晰的，求教各位大佬！ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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做過，大致是先跑電泳，電泳過程涉及的操作液都要非常純，不能徒手操作帶入雜質(zhì)贓物，也要避開容器本身過臟，將跑完電泳的膠轉(zhuǎn)入銀染配套的反應(yīng)液中，按指導(dǎo)手冊(cè)操作，加入配套硝酸銀溶液，然后一定要看著銀染過程，膠和蛋白以及其他微小雜質(zhì)（所以溶液和容器不能有雜質(zhì)臟物，哪怕你徒手碰膠都能留個(gè)指紋�。┒寄鼙蛔厣恋砀街莒`敏，當(dāng)你的蛋白已經(jīng)被染上棕色沉淀且慢慢清晰后即可加入中止液，若是放著任反應(yīng)，回來就是一整塊棕色的膠。所以你可以理解它反應(yīng)靈敏且會(huì)一直生成棕色物進(jìn)行附著，需要看著染色過程，而普通SDS蛋白量要求高，亮藍(lán)染色染再久基本也只是蛋白部分染色， 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2019-05-19 23:17:39
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