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ELIiO鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助酵母菌落PCR方法 已有4人參與
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剛開始接觸分子生物學(xué)，想請教一下各位大佬關(guān)于酵母菌落PCR的方法，目前嘗試了沸水浴和裂解液，都沒有結(jié)果。請問各位還有沒有什么其他的方法了呢。感謝 @biostar2009 @飛約瘋?cè)嗽?/u> 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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ELIiO
2樓2019-07-03 08:35:16
淵博震天
版主 (職業(yè)作家)
Yeast Display
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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建議你挑個單菌落到相應(yīng)1ml培養(yǎng)基培養(yǎng)10h，隨后取 30ul 10mm naoh溶液于10ul菌液中100℃煮沸10min即可。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
3樓2019-07-03 09:58:39
ELIiO
鐵蟲 (小有名氣)
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4樓2019-07-03 11:56:49
ELIiO
鐵蟲 (小有名氣)
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5樓2019-07-03 11:57:30
sannny
新蟲 (正式寫手)
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- 專業(yè): 蛋白質(zhì)組學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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樓主，液氮，沸水兩三個循環(huán)，絕對可以。酵母直接菌落PCR存在的一個主要問題是模板對擴增的干擾。所以你不管用什么方法破菌，都記得稀釋至少20倍作為模板，否則任何條帶都不會有。這是最關(guān)鍵的，破菌方式真不重要，不管用什么方式，總可以破一部分的，對PCR來說都是夠的。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2019-07-03 12:16:49
7樓2019-07-03 13:17:41
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
8樓2019-07-03 14:09:47
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