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餓的神啊新蟲(chóng) (著名寫手)
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預(yù)測(cè)蛋白的全長(zhǎng)CDS擴(kuò)增 已有1人參與
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用NCBI上公布的預(yù)測(cè)蛋白的DNA序列作為模板,設(shè)計(jì)了用于擴(kuò)增全長(zhǎng)CDS的引物,TA克隆后隨機(jī)挑了3個(gè)克隆測(cè)序,結(jié)果比模板多出將近200bp,除去多出的序列,別的都能比對(duì)上,但是翻譯成氨基酸的時(shí)候有很多終止密碼子,最長(zhǎng)的ORF(frame3)比模版對(duì)應(yīng)的少近30aa。 我的目的是擴(kuò)增全長(zhǎng)CDS,用于構(gòu)建載體,這種情況下,我應(yīng)該以NCBI上的預(yù)測(cè)序列為參考,還是實(shí)際測(cè)序所得序列(3個(gè)克隆間序列100%一致),求各位解惑! 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
至尊木蟲(chóng) (文壇精英)
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