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[交流]
請教流式細胞術(shù)測全血中干細胞個數(shù)！ 已有1人參與
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由于本人是學(xué)化學(xué)的，想測定一下給藥前后外周血中內(nèi)皮祖細胞含量的變化。 設(shè)計了個實驗方案，有錯誤和不足之處還請各位高手指教： 1）抽兔血，肝素抗凝 2）加入紅細胞裂解液溶解紅細胞，溶血15-20min，PBS洗兩次 3) 加入一抗，孵育30min，PBS洗一次，1500rpm，離心3min,棄上清 4）加入熒光標記二抗，室溫避光20-30min,PBS洗一次，1500rpm，離心3min，棄上清 5)加入適量PBS，上機檢測（若不能及時上級檢測，可加1ml 1%多聚甲醛固定，可放置一周） 幾個問題： 1）為什么要加裂解液溶解紅細胞 2）PBS洗棄上清液的時候，應(yīng)棄掉多少，怎么掌控 3）流式細胞儀檢測細胞個數(shù)時，細胞最少多少能檢測到 |
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2樓2009-09-03 14:13:51
dljbest
鐵蟲 (初入文壇)
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3樓2010-05-26 22:09:17
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