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miaochunwen銅蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
【交流】羥乙基淀粉40 已有2人參與
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討教關(guān)于乙基淀粉40生產(chǎn)中熱原控制問(wèn)題，我最近做了幾批羥乙基淀粉40，成品檢測(cè)中熱原項(xiàng)均不符合要求。不知問(wèn)題出在哪？請(qǐng)那位高人指點(diǎn)。拜托了。 [ Last edited by jw227 on 2009-9-24 at 15:57 ] |
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5樓2009-10-10 14:38:05
小葉子5501
金蟲(chóng) (小有名氣)
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ynmyx(金幣+1,VIP+0):謝謝分享！歡迎回帖交流！！ 9-24 19:11
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采用家兔法。亦可用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法，有異議時(shí)用家兔法仲裁。 1 家兔法 按《生物制品熱原質(zhì)試驗(yàn)規(guī)程》進(jìn)行，判定標(biāo)準(zhǔn)按該規(guī)程4.2項(xiàng)要求進(jìn)行，其抽樣方法與注射劑量如下： 1.1 抗凝劑 按家兔體重2ml/kg注射。 1.2 采血器及分血漿器 采血器及分血漿器應(yīng)有批號(hào)，每批抽一定數(shù)量進(jìn)行檢查，方法為用100ml氯化鈉注射液通過(guò)，檢查流過(guò)液，應(yīng)無(wú)肉眼可見(jiàn)的混濁或異物，注射劑量按家兔體重10ml/kg注射，合格后方能使用。 1.3 分血漿袋 抽取分血漿袋10只，用100ml氯化鈉注射液清洗，檢查清洗液，應(yīng)無(wú)肉眼可見(jiàn)的混濁和異物，按家兔體重10ml/kg注射。 2 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法 2.1 試驗(yàn)要求 2.1.1 用具處理 試驗(yàn)所用器皿需除去可能存在的外源性?xún)?nèi)毒素，常用的方法是250℃至少30分鐘或180℃至少2小時(shí)干烤。 2.1.2 鱟試劑靈敏度復(fù)核 根據(jù)鱟試劑靈敏度的標(biāo)示值（λ）將細(xì)菌內(nèi)毒素國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品，用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水溶解，在旋渦混合器上混合15分鐘，然后制備成合適的2倍稀釋濃度，即2λ、λ、0.5λ、0.25λ備用，每稀釋一步均應(yīng)在旋渦混合器上混合30秒鐘，按2.2項(xiàng)試驗(yàn)，每一稀釋液平行做4管，如最高濃度4管均為陽(yáng)性，最低濃度4管均為陰性，按下式計(jì)算鱟試劑靈敏度測(cè)定值（λc）。 Λc=log-1（ΣΧ）/4 X為反應(yīng)終點(diǎn)內(nèi)毒素濃度的對(duì)數(shù)值。 當(dāng)λc在0.5～2.0λ（包括0.5λ和2.0λ）時(shí)，方可用于細(xì)菌內(nèi)毒素檢查，并以λc為該批鱟試劑的靈敏度。每批新的鱟試劑在用于試驗(yàn)前都要進(jìn)行靈敏度的復(fù)核。 2.1.3 供試品干擾試驗(yàn) 按2.1.2項(xiàng)試驗(yàn)，用供試品的最大有效稀釋液將細(xì)菌內(nèi)毒素國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品制成2.0λ、0.5λ、0.25λ濃度稀釋液。供試品的最大有效稀釋倍數(shù)（D）按下式計(jì)算： D=L/λ L為供試品的細(xì)菌內(nèi)毒素限值（EU/ml）。 如果有供試品和無(wú)供試品測(cè)得的鱟試劑靈敏度（λc）在0.5～2.0λ（包括0.5λ和2.0λ）時(shí)，則認(rèn)為供試品在該濃度下不干擾試驗(yàn)，否則需要進(jìn)行適當(dāng)處理后重復(fù)本試驗(yàn)。使用更靈敏的鱟試劑，對(duì)供試品進(jìn)行更大的倍數(shù)稀釋?zhuān)桥懦蓴_的簡(jiǎn)單有效方法。 2.1.4 供試品 2.1.4.1 抗凝劑 取原液作160倍稀釋后測(cè)定。原液細(xì)菌內(nèi)毒素含量應(yīng)≤5.56EU/ml。 2.1.4.2 采血漿器及分血漿器 取1.2項(xiàng)流過(guò)液測(cè)定。細(xì)菌內(nèi)毒素含量應(yīng)≤0.5EU/ml。 2.1.4.3 分血漿袋 取1.3項(xiàng)清洗液測(cè)定。細(xì)菌內(nèi)毒素含量應(yīng)≤0.5EU/ml。 2.2 方法 取裝有0.1ml鱟試劑溶液的10×75mm試管（或0.1ml/支規(guī)格的鱟試劑原安瓿）4支，其中2支加入0.1ml供試品作為供試管，1支加入2λ內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品溶液0.1ml作為陽(yáng)性對(duì)照管，1支加入細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水0.1ml作為陰性對(duì)照管。將試管中溶液輕輕混勻后，封閉管口，垂直放入37±1℃水浴中，保溫60±2分鐘。保溫和拿取試管過(guò)程應(yīng)避免受到振動(dòng)造成假陰性結(jié)果。 2.3 結(jié)果判定 將試管從水浴中輕輕取出，緩緩倒轉(zhuǎn)180°時(shí)，管內(nèi)凝膠不變形，不從管壁滑脫者為陽(yáng)性，記錄為（ ）；凝膠不能保持完整并從管壁滑脫者為陰性，記錄為（-）。供試品兩管均為（-）應(yīng)認(rèn)為符合規(guī)定；如兩管均為（ ），應(yīng)認(rèn)為不符合規(guī)定；如兩管中1管為（ ），1管為（-），按上述方法另取4管供試品管復(fù)試，4管中有1管為（ ），即認(rèn)為不符合規(guī)定。陽(yáng)性對(duì)照為（-）或陰性對(duì)照為（ ），試驗(yàn)無(wú)效 |
2樓2009-09-24 18:39:30
yinguang
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4樓2009-10-10 13:33:16
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