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[交流]
【求助/交流】求助-關(guān)于核蛋白單克隆抗體細(xì)胞免疫熒光問題 已有1人參與
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| 核蛋白(NP)為流感病毒內(nèi)部比較保守的結(jié)構(gòu)蛋白,用其免疫動物制備的單克隆抗體進(jìn)行細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn),即一定濃度的流感病毒感染MDCK細(xì)胞,待細(xì)胞出現(xiàn)病變時用冰浴的無水乙醇固定20min,PBS洗滌后加入抗NP單克隆抗體孵育45min,之后用PBS洗三次,在加入稀釋到工作濃度的熒光二抗孵育45min,PBS洗三次后在熒光顯微鏡下觀察結(jié)果,結(jié)果有綠色熒光的發(fā)出。一般細(xì)胞免疫反應(yīng)時抗體都是和遞呈到細(xì)胞表面的蛋白發(fā)生作用,從而加入熒光二抗后而出現(xiàn)的綠色熒光。而核蛋白為流感病毒的內(nèi)部結(jié)構(gòu)蛋白,單抗又是怎樣和內(nèi)部結(jié)構(gòu)蛋白發(fā)生反應(yīng)的呀?請各位大俠的指導(dǎo)。 |
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