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rivergf銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】大家來(lái)看看我的SDS-PAGE圖，為什么有些主帶分成了好幾條小帶??? 已有11人參與
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大家來(lái)看看我的SDS-PAGE圖，為什么有些主帶分成了好幾條小帶??? 我的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容大致是這樣的：酵母菌培養(yǎng)----取樣----離心，收集沉淀----洗滌----沉淀加入裂解液（裂解液包括CHAPS、硫脲、尿素、DTT）----液氮研磨----離心，取上清做電泳！ 為什么會(huì)出現(xiàn)這樣的條帶�。� 我的Marker跑的很好，說(shuō)明膠應(yīng)該沒有問(wèn)題，那就應(yīng)該是我蛋白質(zhì)樣液出現(xiàn)了問(wèn)題！到底是什么問(wèn)題？有誰(shuí)以前見過(guò)這種情況嗎？ 我先說(shuō)聲謝謝了�。�！ |
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sl19821129
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7樓2010-04-25 23:05:50
rivergf
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2樓2010-04-25 19:51:04
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5樓2010-04-25 21:47:11
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我也曾遇到和樓主一樣的情況，但是還沒有這么厲害，只是中間出現(xiàn)一條帶（就是把橫行帶分成了兩部分）。 可能的原因是蛋白樣本中有顆粒性成分，沒有隨著蛋白的移動(dòng)而一起向下涌動(dòng)，而是一直停留在加樣孔中，阻止了它下面的蛋白的電泳途徑，而形成了樓主照片中的條帶。我后來(lái)加長(zhǎng)了樣本離心轉(zhuǎn)速，12000rpm，5min ，條帶就好些了，沒出現(xiàn)原來(lái)的情況了。 你可以試試，如果排除了這個(gè)原因，你再看看是不是像樓上說(shuō)的膠做的不成型的原因，實(shí)驗(yàn)不順利的原因很多種，需要慢慢分析與排除，祝好運(yùn)！ |
6樓2010-04-25 22:31:32
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