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panlook木蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】求pKD46質(zhì)粒 已有2人參與
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我?guī)煹軓睦贤饽琴I了個pKD46 我一直在鑒定測序 可就是檢測不出來是否是pKD46 送了好多地方 就是測序測不出來 而現(xiàn)在實驗也一直不成功 不知道是否是質(zhì)粒的原因, 有pKD46的同學(xué)能否聯(lián)系我一下 可以用實驗室質(zhì)粒換 也可以適當(dāng)出點錢購買 謝謝~~~~~ |
木蟲 (正式寫手)
夢幻biobrick

木蟲 (著名寫手)
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樓主你好,不知pKD46質(zhì)粒測序驗證這一步,你是怎么解決的呢? 我最近也在做敲除,用到pKD46質(zhì)粒。但是我買來pKD46甘油菌后,劃線、挑單克隆、提質(zhì)粒,然后就是測序驗證。 但是,我一直卡在了質(zhì)粒測序驗證這一步。我多次提取,測序引物為自己設(shè)計,選的質(zhì)粒上前后兩段, 單獨菌落pcr已經(jīng)驗證過可以擴出條帶,但是把質(zhì)粒和引物送公司測序后就一直測序失敗。 給的理由是引物結(jié)合不上或是治理不純等。 所以想請教樓主,能否指點一下,質(zhì)粒驗證這一步,我還要怎么做呢。真的沒招了,在這上面也已經(jīng)耽誤好長時間了。 |

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