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dfl204鐵桿木蟲 (著名寫手)
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[交流]
【求助/交流】酵母雜交篩庫一般都長多少的克隆
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請教各位蟲友： 近期用clontech公司的Y1H Gold系統(tǒng)進行單雜交。誘餌為3X100bp的長度，篩庫后3天長出的克隆大概有1000個了。請問是否正常？ 后續(xù)的分析應(yīng)該怎么繼續(xù)？ PCR-去除短的克隆---提質(zhì)粒---轉(zhuǎn)大腸桿菌---提質(zhì)粒---再轉(zhuǎn)化誘餌載體去除假陽性？ 這樣的話工作量很大，都有什么好的方法？ 酵母的菌落PCR怎么做最方便？ 我們一般都是先加0.02M NaOH沸水煮過以后用來做模板。 |
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