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騎著蝸牛追火箭木蟲 (著名寫手)
納米小生
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[交流]
【求助/交流】大家的MTT法OD值是多少？ 已有5人參與
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大家好，我最近做MTT，新手上路，OD值只有0.1-0.2，有人說太小，大家一般是多少？ 我的做法是這樣的，5000cell/孔，接種后過夜。一排八孔，設(shè)兩排。一排只有細(xì)胞，用培養(yǎng)基培養(yǎng)，一排有細(xì)胞，并且有我的樣品。A1孔為調(diào)零孔，沒有細(xì)胞，其它操作與其它孔均相同。MTT5mg/mL，加入20uL，4h后，小心吸出上清液，加入150mLDMSO，振蕩，檢測。 做出來的圖看起來還可以，就是OD值太小。想說明的是我的樣品沒有毒，也不影響細(xì)胞增殖，所以沒有用成活率來做圖。 |
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dhd997
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lstt09nk(金幣+2):熱心蟲友，歡迎交流~~ 2010-06-03 18:49:20
騎著蝸牛追火箭(金幣+4):謝謝，我打算接種后培養(yǎng)兩天再接藥 2010-06-04 09:08:09
lstt09nk(金幣+2):熱心蟲友，歡迎交流~~ 2010-06-03 18:49:20
騎著蝸牛追火箭(金幣+4):謝謝，我打算接種后培養(yǎng)兩天再接藥 2010-06-04 09:08:09
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其他按規(guī)范操作，應(yīng)該是細(xì)胞生長達(dá)到對(duì)數(shù)期70%-80%的時(shí)候進(jìn)行加藥。 另外就是你的細(xì)胞活力如何。這個(gè)也可以想象，如果每個(gè)細(xì)胞半死不活的，細(xì)胞再多，甲瓚也不會(huì)太多。如果細(xì)胞活力很大，少量的細(xì)胞估計(jì)甲瓚也足夠了。 所有細(xì)胞量的多少要探索好的。 還有我用過不同品牌的MTT好像吸光值不太一樣，我也不知道為啥，不過值得注意單因素，一直用同一個(gè)品牌的比較好吧。 |
7樓2010-06-03 17:43:02
weiyanbme
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2樓2010-06-03 11:41:06
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3樓2010-06-03 11:43:36
dhd997
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4樓2010-06-03 12:14:48
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