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marcia0219新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
【求助/交流】如何從篩選cDNA文庫(kù)？ 已有3人參與
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我想從cDNA文庫(kù)中篩選目的基因，現(xiàn)在已知該基因的一個(gè)片段，大概500bp 能想到的方法就是在這500bp上設(shè)計(jì)引物，做PCR，然后能批到500片段的單克隆就送測(cè)序。問(wèn)題是，如果這個(gè)基因很長(zhǎng)，那在某個(gè)單克隆里找到全長(zhǎng)的機(jī)會(huì)太小了。而且，這得做多少次PCR，太龐大的工作量。 還有一個(gè)就是在500bp上設(shè)計(jì)一個(gè)引物，在載體上再設(shè)計(jì)一個(gè)引物，兩頭PCR，看能不能接起來(lái)。同樣，工作量也很大。 我實(shí)驗(yàn)做的不多，能想到的就這些了。想請(qǐng)問(wèn)還有什么其他的思路？謝謝 |
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ben1147
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4樓2010-06-08 23:04:14
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