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barrey鐵蟲 (正式寫手)
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[交流]
【求助/交流】關(guān)于微生物的轉(zhuǎn)化
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Sample TextSample Text 最近一直做細(xì)菌的轉(zhuǎn)化,試圖將攜帶GFP的載體轉(zhuǎn)入細(xì)菌后再侵染植物,菌株是實驗室分離的,別人提供的菌株有轉(zhuǎn)化陽性的以及在大腸桿菌C118株系中的兩種，由于轉(zhuǎn)化陽性的菌株并不能侵染我的目標(biāo)植物，我提取自己分離的菌株的感受態(tài)后電轉(zhuǎn)從C118株系中提取的質(zhì)粒DNA，在平板上能長出克隆，但是并不能檢測到綠色熒光，搖菌后直接觀察也沒有，直接以菌液為模板擴增GFP的結(jié)果也為陰性（GFP整合到細(xì)菌基因組中），可能轉(zhuǎn)化結(jié)果為陰性。 另外，曾經(jīng)提取一個克隆子搖菌產(chǎn)物的DNA，用GFP引物擴增結(jié)果為陽性，片段大小與質(zhì)粒DNA擴增結(jié)果一致，而與轉(zhuǎn)化陽性菌株擴增的片段大小存在差異，一直很費解，同樣的細(xì)菌轉(zhuǎn)化后片段會不一致，同樣的載體，不知道表述清楚沒有，請高手指點 |
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