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[交流]
【求助/交流】genomic sequence 和 cloning sequence 不一致
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先用PCR 直接擴(kuò)增genomic DNA，測(cè)序后發(fā)現(xiàn)有等高的雙峰，推測(cè)是等位基因。 然后對(duì)同一個(gè)體的DNA PCR后用E.coli克隆，再測(cè)序卻發(fā)現(xiàn)只有1/4到1/3的colony顯示出了其中一個(gè)峰，也就是說(shuō)比例發(fā)生了變化從1：1變成了2：1到3：1，請(qǐng)問(wèn)這種情況常見(jiàn)嗎？是測(cè)序的原因呢，還是DNA結(jié)構(gòu)的問(wèn)題，又或者是E.coli有傾向性的克隆了某種PCR產(chǎn)物？ |
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