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guogege木蟲 (小有名氣)
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| 請(qǐng)各位大俠們幫忙,誰(shuí)有微量肉湯稀釋法測(cè)MIC的標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)的方法,包括接種菌液的濃度,如何操作。我是新手,還請(qǐng)各位幫忙! |
木蟲 (小有名氣)
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1.抗菌藥物和培養(yǎng)基制備 同常量肉湯稀釋法 。 2.MIC板制備 無(wú)菌操作,將倍比稀釋后不同濃度的抗菌藥物溶液分別加到滅菌的96孔聚苯乙烯板中,第1至第11孔加藥液,每孔10μl,第12孔不加藥作為生長(zhǎng)對(duì)照,冰凍干燥后密封,-20℃以下保存?zhèn)溆谩?br /> 3.接種物制備 將用生長(zhǎng)法或直接菌懸液法制備的濃度相當(dāng)于0.5麥?zhǔn)媳葷針?biāo)準(zhǔn)的菌懸液,經(jīng)MH肉湯1∶1000稀釋后,向每孔中加100μl,密封后置35℃普通空氣孵箱中,孵育16~20h判斷結(jié)果。當(dāng)試驗(yàn)嗜血桿菌屬,鏈球菌屬時(shí),孵育時(shí)間為20~24h,試驗(yàn)葡萄球菌和腸球菌對(duì)苯唑西林和萬(wàn)古霉素的藥敏試驗(yàn)時(shí)孵育時(shí)間必須滿24h。此時(shí),第1孔至第11孔藥物濃度分別為128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125μg/ml。 4.結(jié)果判斷 以在小孔內(nèi)完全抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的最低藥物濃度為MIC。當(dāng)陽(yáng)性對(duì)照孔(即不含抗生素)內(nèi)細(xì)菌明顯生長(zhǎng)試驗(yàn)才有意義。當(dāng)在微量肉湯稀釋法出現(xiàn)單一的跳孔時(shí),應(yīng)記錄抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的最高藥物濃度。如出現(xiàn)多處跳孔,則不應(yīng)報(bào)告結(jié)果,需重復(fù)試驗(yàn)。通常對(duì)革蘭陰性桿菌而言,微量肉湯稀釋法測(cè)得的MIC與常量肉湯稀釋法測(cè)得的結(jié)果相同或低一個(gè)稀釋度(1孔或2倍)。 |

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