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蟲子739鐵蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】一個(gè)基因大概有2500bp左右。很長很長時(shí)間了,還沒搞定,郁悶!請各位大? 已有4人參與
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基因全長---一頭霧水 植物基因,這個(gè)基因包括很多重復(fù)序列,大多為 G I V D R A K D T V G M G P N重復(fù),也不知道這是什么片段,推測跟抗逆相關(guān)。根據(jù)GenBank和文獻(xiàn)中的序列信息,設(shè)計(jì)引物,首先獲得基因組DNA序列,1700多,和文獻(xiàn)中的DNA序列差異較大。用同樣的引物,mRNA序列一直沒有獲得。 現(xiàn)在做RACE,挑取3個(gè)克隆,其中兩個(gè)重復(fù),一個(gè)二次PCR產(chǎn)物。發(fā)現(xiàn)這二次PCR和一次的序列同源性幾乎沒有,除了引物序列。Why?? 兩個(gè)重復(fù)的克隆同源性還行,但這兩個(gè)單克隆測序報(bào)告中指出不是單克隆,有套峰,明明是單克隆,為什么又這種情況? 謝謝! |
木蟲 (正式寫手)
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