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ymzfeng金蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】轉(zhuǎn)基因表達(dá)載體構(gòu)建 已有4人參與
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最近想將擬南芥的一個(gè)基因轉(zhuǎn)入煙草中，請(qǐng)問(wèn)哪位高手知道構(gòu)建基因表達(dá)載體有什么要求嗎？它與超表達(dá)載體有什么區(qū)別？我想用pCambia1301來(lái)做，可它的MCS在啟動(dòng)子后面，不知怎么插入片段 還望高手指教 謝謝！  |
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ben1147
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2樓2010-06-19 17:28:07
pan琳l(shuí)in
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小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
lstt09nk:這個(gè)以前看過(guò)，貌似是載體的要求什么的~~ 2010-06-19 18:21:39
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
lstt09nk:這個(gè)以前看過(guò)，貌似是載體的要求什么的~~ 2010-06-19 18:21:39
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①能在宿主細(xì)胞中復(fù)制繁殖，而且最好要有較高的自主復(fù)制能力。 ②容易進(jìn)入宿主細(xì)胞，而且進(jìn)入效率越高越好。 ③容易插入外來(lái)核酸片段，插入后不影響其進(jìn)入宿主細(xì)胞和在細(xì)胞中的復(fù)制。這就要求載體DNA上要有合適的限制性核酸內(nèi)切酶位點(diǎn)。 ④容易從宿主細(xì)胞中分離純化出來(lái)， 這才便于重組操作。 ⑤有容易被識(shí)別篩選的標(biāo)志，當(dāng)其進(jìn)入宿主細(xì)胞、或攜帶著外來(lái)的核酸序列進(jìn)入宿主細(xì)胞都能容易被辨認(rèn)和分離出來(lái)。這才介于克隆操作。  |
3樓2010-06-19 17:32:44
ymzfeng
金蟲 (小有名氣)
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4樓2010-06-20 14:43:22
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5樓2011-05-24 16:27:18
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