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聽雪看山木蟲 (職業(yè)作家)
西游家族之T所長
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[交流]
【求助/交流】如何提高DNA的濃度 已有3人參與
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建立的construct 需要做原生質體融合，construct的濃度至少需要1000ng/ul,而我手頭上的這個只有250ng/ul左右。 是不是用ethanol 離心還是什么的。。。不懂得方法。。。請指教，謝謝了 |
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2樓2010-06-23 22:23:24
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Materials 3M Sodium Acetate buffer, pH 5.2 (store at 4 °C) Cold 100% Ethanol (-20°C) Cold 70% Ethanol in sterile dH2O (-20°C) DNA sample 4 °C Microcentrifuge (normal microcentrifuge in cold room works fine). All centrifugations should be on "soft" (no brake) setting. Procedure 1.Transfer DNA to a container where it fills one fourth the total volume (a 500 µL tube should have no more than 125 µL of DNA solution, for example) 2.Add one tenth volume of Sodium Acetate buffer to equalize ion concentrations 3.Add at least two volumes of cold 100% ethanol; let stand in -20°C freezer for at least one hour 4.Centrifuge sample for 15 minutes at highest speed in a 4°C microcentrifuge 5.Remove as much supernatant as possible with a 1 mL micropipet; recentrifuge, then remove the rest with a 200 µL pipet 6.Add 200 µL of cold 70% ethanol; centrifuge for 5 minutes in a 4 °C centrifuge 7.Remove supernatant with a 200 µL pipet; evaporate remaining ethanol in a 37 °C water bath 8.Resuspend pellet in desired volume of water or TE buffer 后來，我用的方法 |
7樓2010-06-28 22:56:34
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