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fusheng011新蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】如何根據(jù)熒光顯微鏡選擇熒光標(biāo)記的二抗?? 已有1人參與
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大家好 最近要做免疫熒光 可是以前沒(méi)有做過(guò) 有些問(wèn)題需要請(qǐng)教: 通過(guò)查資料 知道熒光標(biāo)記的抗體有多種 如FITC標(biāo)記的 Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 555標(biāo)記山羊抗小鼠IgG(H+L)等等多種抗體 但是我看到有的熒光標(biāo)記的抗體說(shuō)明書上說(shuō)明不同的熒光基團(tuán)有不同的吸收峰(Absorption Peak)和發(fā)射峰(Emission Peak)。 比如: FITC標(biāo)記山羊抗小鼠IgG(H+L) Absorption Peak(nm):492 Emission Peak(nm):520 Alexa Fluor 488標(biāo)記山羊抗小鼠IgG(H+L) Absorption Peak(nm):495 Emission Peak(nm):519 另外還有很多不同的熒光基團(tuán)他們的吸收峰和發(fā)射峰都各不相同,顏色也各不相同,我要請(qǐng)教的問(wèn)題是我不知道我隨便選擇一個(gè)熒光基團(tuán)標(biāo)記的抗體在我的顯微鏡上都能看到應(yīng)該看到的熒光嗎?是不是需要根據(jù)我的熒光顯微鏡的參數(shù)范圍來(lái)選擇相應(yīng)熒光基團(tuán)標(biāo)記的抗體呢?如果是該怎么選擇呢?我不是很懂,期望得到指導(dǎo)。≈x謝! |
至尊木蟲 (文壇精英)
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