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zephyr0911新蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】關(guān)于相對(duì)定量的重復(fù)板數(shù)據(jù)處理 已有3人參與
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各位好! 最近我在做的實(shí)驗(yàn)是這樣的,一共做10個(gè)基因。每個(gè)板上做3個(gè)(包括一個(gè)參照,實(shí)際是兩個(gè))。我發(fā)現(xiàn)同樣的基因在不同板上跑出來(lái)的結(jié)果很不一樣,包括有兩個(gè)連趨勢(shì)都不一樣,有些是表達(dá)量差異很大,幾十倍的差異。請(qǐng)問(wèn)我最后想要把這些所有基因整合到一張圖上去,這些不同板上重復(fù)的數(shù)據(jù)我怎么處理呢?還有這種板之間的差異正常嗎? PS 我用的SYBR染料,ROCHE LIGHT機(jī)子。 謝謝大家了! |
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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板之間要加入一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)來(lái)扣除每次的誤差哦 我是把cDNA分裝成一次用量的小份放在-80保存,每次拿一管出來(lái)擴(kuò)3孔內(nèi)參,當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)使 另外做實(shí)時(shí)定量一定要用進(jìn)口的槍頭,用同一套槍,最好同一個(gè)人混樣,每次點(diǎn)樣的位置都一樣,這樣誤差就能減小不少 還有就是復(fù)孔之間的標(biāo)準(zhǔn)差有多大呢?如果是因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)差大導(dǎo)致均數(shù)差異大那么其實(shí)還是個(gè)均一性的問(wèn)題 |
鐵桿木蟲 (著名寫手)
新蟲 (小有名氣)
新蟲 (小有名氣)
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