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【求助】血清中催乳素(PRL)的檢測方法 已有1人參與
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| 哪位好心人幫我解答一下。耗壳把逯写呷樗兀≒RL)的檢測有哪些方法,這些方法的原理主要是怎么樣的? |
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免疫化學(xué)發(fā)光法常用,用抗原抗體結(jié)合免疫學(xué)原理,化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析又稱化學(xué)發(fā)光免疫分析(CL IA ) , 是用化學(xué)發(fā)光劑直接標(biāo)記抗原或抗體的免疫分析方法。常用于標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光物質(zhì)有吖啶酯類化合物——acridin ium ester (A E) , 是有效的發(fā)光標(biāo)記物[ 3 ] , 其通過起動發(fā)光試劑(N aOH2H2O 2 ) 作用而發(fā)光, 強烈的直接發(fā)光在一秒鐘內(nèi)完成, 為快速的閃爍發(fā)光(見圖1)。吖啶酯作為標(biāo)記物用于免疫分析, 其化學(xué)反應(yīng)簡單、快速、無須催化劑; 檢測小分子抗原采用競爭法(見圖2) , 大分子抗原則采用夾心法(見圖3) , 非特異性結(jié)合少, 本底低; 與大分子的結(jié)合不會減小所產(chǎn)生的光量, 從而增加靈敏度。常用的底物為魯米諾(32氨基鄰苯二甲酰肼,lum ino l) , 或其衍生物如異魯米諾(42氨基鄰苯二甲酰肼) , 是一類重要的發(fā)光試劑。其結(jié)構(gòu)如圖4 所示。魯米諾的氧化反應(yīng)在堿性緩沖液中進(jìn)行, 在過氧化物酶及活性氧[ 過氧化陰離子(O 2- ) , 單線態(tài)氧(1O 2 ) , 羥自由基(OH·) , 過氧化氫(H2O 2) ]存在下,生成激發(fā)態(tài)中間體, 當(dāng)其回到基態(tài)時發(fā)光, 其波長為425nm。 早期用魯米諾直接標(biāo)記抗原(或抗體) , 但標(biāo)記后發(fā)光強度降低而使靈敏度受到影響。近來用過氧化物酶標(biāo)記抗體, 進(jìn)行免疫反應(yīng)后利用魯米諾作為發(fā)光底物, 在過氧化物酶和起動發(fā)光試劑(N aOH2H2O 2) 作用下, 魯米諾發(fā)光, 發(fā)光強度依賴于酶免疫反應(yīng)物中酶的濃度。Kodak Am erliteTM 半自動分析系統(tǒng)就是利用這一體系專門設(shè)計的。 羅氏公司有用于臨床的試劑盒,配合特殊儀器使用,有點大醫(yī)院有! |

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