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[交流]
【求助/交流】有誰(shuí)做過(guò)IL2(白介素2）的純化？或者類似不帶標(biāo)簽的包涵體的純化 已有2人參與
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有誰(shuí)做過(guò)IL2(白介素2）的純化？ 現(xiàn)在蛋白是以包涵體形式存在（不帶His)，誰(shuí)能提供以下工藝？謝謝 目前我門做的用尿素溶解，先過(guò)陰陽(yáng)離子柱，現(xiàn)在效果不好，目的蛋白沒(méi)有集中在一個(gè)鹽離子梯度下洗脫下來(lái)，純度也不高，誰(shuí)有更好的方法？ 現(xiàn)在情況是： 1. 蛋白溶解效果不好，目的蛋白在酸性條件溶解效果不好，在堿性條件下隨著PH的增高，蛋白溶解效果增高。 2. 陽(yáng)離子柱，目的蛋白都掛柱，在鹽離子梯度下洗脫出少量目的蛋白，鹽酸胍清柱收集到部分目的蛋白，但是純度不高。 3. 陰離子柱，目的蛋白50%-60%掛柱，目的蛋白沒(méi)有集中在某個(gè)鹽離子梯度下被洗脫下來(lái)，而是從開(kāi)始到結(jié)束都有目的蛋白，在50%B洗脫的蛋白純度較高，但是目的蛋白量少，鹽酸胍清柱收集到部分目的蛋白，純度比陽(yáng)離子柱高。 |
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金蟲 (小有名氣)
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3樓2021-03-20 14:53:40
2樓2019-09-29 09:20:25
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