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juanzi_wan金蟲 (正式寫手)
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[color=]培養(yǎng)基的配制 一、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(培養(yǎng)細(xì)菌用) 牛肉膏 3g 蛋白胨 10g NaCl 5g 瓊脂 15—20g 水 1000ml pH 7．0—7．2 1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。 二、淀粉瓊脂培養(yǎng)基(高氏1號培養(yǎng)基，培養(yǎng)放線菌用) 可溶性淀粉 20g KNO3 1g NaCl 0．5g K2 HPO4 0．5g MgSO4 0．5g FeSO4 0．01g 瓊脂 20g 水 1000ml pH 7．2—7．4 配制時，先用少量冷水，將淀粉調(diào)成糊狀，在火上加熱，邊攪拌邊加水及其他成分，溶化后，補(bǔ)足水分至1000ml。1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。 三、查氏培養(yǎng)基(培養(yǎng)霉菌用，實(shí)驗(yàn)16) NaNO3 2g K2 HPO4 1g KCl 0．5g MgSO4 0．5g FeSO4 0．01g 蔗糖 30g 瓊脂 15—20g 水 1000ml pH 自然 1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。 四、馬丁氏(Martin)瓊脂培養(yǎng)基(分離真菌用) 葡萄糖 10g 蛋白胨 5g KH2 PO4 1g MgSO4 •7H2 O 0．5g 1/3000孟加拉紅(rose bengal，玫瑰紅水溶液) 100ml 瓊脂 15—20g pH 自然 蒸餾水 800ml 0．56kg/cm2 (8磅/英寸2 )，112．6℃滅菌30分鐘。 臨用前加入0．03%鏈霉素稀釋液100ml，使每毫升培養(yǎng)基中含鏈霉素30μg。 五、馬鈴薯培養(yǎng)基 (實(shí)驗(yàn)16) 馬鈴薯 200g 蔗糖(或葡萄糖) 20g 瓊脂 15—20g 水 1000ml pH 自然 馬鈴薯去皮，切成塊煮沸半小時，然后用紗布過濾，再加糖及瓊脂，溶化后補(bǔ)足水至1000ml。1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。 六、麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基 (實(shí)驗(yàn)15) 1．取大麥或小麥若干，用水洗凈，浸水6—12小時，置15℃陰暗處發(fā)芽，上蓋紗布一塊，每日早、中、晚淋水一次，麥根伸長至麥粒的兩倍時，即停止發(fā)芽，攤開曬干或烘干，貯存?zhèn)溆谩?br /> 2．將干麥芽磨碎，一份麥芽加四份水，在65℃水浴鍋中糖化3—4小時，糖化程度可用碘滴定之。 3．將糖化液用4—6層紗布過濾，濾液如混濁不清，可用雞蛋白澄清，方法是將一個雞蛋白加水約20ml，調(diào)勻至生泡沫時為止，然后倒在糖化液中攪拌煮沸后再過濾。 4．將濾液稀釋到5—6波美度，pH約6．4，加入2%瓊脂即成。 1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。 七、葡萄糖-醋酸鹽培養(yǎng)基 (實(shí)驗(yàn)15) 葡萄糖 1g 酵母浸膏 2．5g 醋酸鈉 8．2g 瓊脂 15g 蒸餾水 1000ml pH 4．8 分裝試管，0．70kg/cm2 (10磅/英寸2 )，115．2℃滅菌20分鐘后制成斜面。 八、半固體肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 (實(shí)驗(yàn)26) 肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基 100ml 瓊脂 0．35—0．4g pH 7．6 1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。 九、合成培養(yǎng)基 (實(shí)驗(yàn)36，39) (NH4 )2 PO4 1g KCl 0．2g MgSO4 •7H2 O 0．2g 豆芽汁 10ml 瓊脂 20g 蒸餾水 1000ml pH 7．0 加12ml0．04%的溴甲酚紫(pH5．2—6．8，顏色由黃色變紫色，作指示劑)。1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。 十、豆芽汁蔗糖(或葡萄糖)培養(yǎng)基 (實(shí)驗(yàn)37，38) 黃豆芽 100g 蔗糖(或葡萄糖) 50g 水 1000ml pH 自然 稱新鮮豆芽100g，放入燒杯中，加水1000ml，煮沸約半小時，用紗布過濾。用水補(bǔ)足原量，再加入蔗糖(或葡萄糖)50g，煮沸溶化。1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。 十一、油脂培養(yǎng)基 (實(shí)驗(yàn)40) 蛋白胨 10g 牛肉膏 5g NaCl 5g 香油或花生油 10g 1．6%中性紅水溶液 1ml 瓊脂 15—20g 蒸餾水 1000ml pH 7．2 1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。 注：1．不能使用變質(zhì)油。 2．油和瓊脂及水先加熱。 3．調(diào)好pH后，再加入中性紅。 4．分裝時，需不斷攪拌，使油均勻分布于培養(yǎng)基中。 十二、淀粉培養(yǎng)基 (實(shí)驗(yàn)40，45) 蛋白胨 10g NaCl 5克 牛肉膏 5克 可溶性淀粉 2g 蒸餾水 1000ml 瓊脂 15—20g 1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。 十三、明膠培養(yǎng)基 (實(shí)驗(yàn)40) 牛肉膏蛋白胨液 100ml 明膠 12—18g pH 7．2—7．4 在水浴鍋中將上述成分溶化，不斷攪拌。溶化后調(diào)pH7．2—7．4。 0．56kg/cm2 (8磅/英寸2 )，112．6℃滅菌30分鐘。 十四、蛋白胨水培養(yǎng)基 (實(shí)驗(yàn)42) 蛋白胨 10g NaCl 5克 水 1000ml pH 7．6 1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。 十五、糖發(fā)酵培養(yǎng)基 (實(shí)驗(yàn)41) 蛋白胨水培養(yǎng)基 1000ml 酸性復(fù)紅水溶液① 2—5ml pH 7．6 另配20%糖溶液(葡萄糖、乳糖、蔗糖等)各10ml。 制法： 1．將上述含指示劑的蛋白胨水培養(yǎng)基(pH7．6)分裝于試管中，在每管內(nèi)放一倒置的小玻璃管，使充滿培養(yǎng)液。 2．將已分裝好的蛋白胨水和20%的各種糖溶液分別滅菌，蛋白胨水1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘；糖溶液0．56kg/cm2 (8磅/英寸2 )，112．6℃滅菌30分鐘。 3．滅菌后，每管以無菌操作分別加入20%的無菌糖溶液0．5ml(按每10ml培養(yǎng)基中加入20%的糖液0．5ml，則成1%的濃度)。 配制用的試管必須洗干凈，避免結(jié)果混亂。 ①0．5%酸性復(fù)紅水溶液100ml加1mol/LNaOH16ml即成。 十六、葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基 (實(shí)驗(yàn)42) 蛋白胨 5g 葡萄糖 5g K2 HPO4 2g 蒸餾水 1000ml 將上述各成分溶于1000ml水中，調(diào)pH7．0—7．2，過濾。分裝試管，每管10ml，0．56kg/cm2 (8磅/英寸2 )，112．6℃滅菌30分鐘。 十七、H2 S試驗(yàn)用培養(yǎng)基 (實(shí)驗(yàn)42) 蛋白胨 20g NaCl 5g 檸檬酸鐵銨 0．5g Na2 S2 O3 0．5g 瓊脂 15—20g 蒸餾水 1000ml pH 7．2 先將瓊脂、蛋白胨溶化，冷至60℃加入其他成分。分裝試管，0．56kg/cm2 (8磅/英寸2 )，112．6℃滅菌15分鐘，備用。 十八、檸檬酸鹽培養(yǎng)基 (實(shí)驗(yàn)42) NH4 H2 PO4 1g K2 HPO4 1g NaCl 5g MgSO4 0．2g 檸檬酸鈉 2g 瓊脂 15—20g 蒸餾水 1000ml 1%溴麝香草酚藍(lán)酒精液 10ml 將上述各成分加熱溶解后，調(diào)pH6．8，然后加入指示劑，搖勻，用脫脂棉過濾。制成后為黃綠色，分裝試管，1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘后制成斜面。 十九、土霉素效價測定用培養(yǎng)基 (實(shí)驗(yàn)44) 培養(yǎng)基Ⅰ(供培養(yǎng)試驗(yàn)菌用) 蛋白胨 5g 酵母膏 3g 牛肉膏 1．5g NaCl 3．5g 葡萄糖 1g K2 HPO4 3．68g KH2 PO4 1．32g 瓊脂 20—25g 蒸餾水 1000ml pH 7．2 1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。 培養(yǎng)基Ⅱ(供攤布雙碟的上，下層用) 蛋白胨 6g 酵母膏 6g 牛肉膏 1．5g 葡萄糖 1g 瓊脂 15—18g 蒸餾水 1000ml pH 6．8 1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。 二十、酪蛋白培養(yǎng)基 (實(shí)驗(yàn)46) KH2 PO4 0．36g Na2 HPO4 •12H2 O 1．3g NaCl 0．1g ZnSO4 •7H2 O 0．02g CaCl2 •2H2 O 0．002g 酪素 4g 酪素水解氨基酸 0．05g 瓊脂 15—20g 蒸餾水 1000ml pH 7．0—7．2 先稱取4g酪素，再加入0．5mol/LNaOH約2ml，將酪素溶解；然后依次加入其他藥品，最后調(diào)pH7．0—7．2。0．56kg/cm2 (8磅/英寸2 )，112．6℃滅菌30分鐘。 二十一、完全培養(yǎng)基(TYEG培養(yǎng)基) (實(shí)驗(yàn)47) 胰蛋白胨 10g 酵母浸膏 5g K2 HPO4 3g 葡萄糖 1g 瓊脂 15—20g 蒸餾水 1000ml pH 7．0 1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。 二十二、基本培養(yǎng)基(MM培養(yǎng)基) (實(shí)驗(yàn)47) (NH4 )2 SO4 1g K2 HPO4 7g KH2 PO4 3g 檸檬酸鈉 0．5g MgSO4 •7H2 O 0．1g 葡萄糖 5g 瓊脂 15—20g 蒸餾水 1000ml 1．05kg/cm2 ，121．3℃滅菌20分鐘。 二十三、復(fù)紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基(遠(yuǎn)藤氏培養(yǎng)基) (實(shí)驗(yàn)60，61) 蛋白胨 10g 乳糖 10g K2 HPO4 3．5g 瓊脂 20—30g 蒸餾水 1000ml 無水亞硫酸鈉 5g左右 5%堿性復(fù)紅乙醇溶液 20ml 先將瓊脂加入900ml蒸餾水中，加熱溶解，再加入磷酸氫二鉀及蛋白胨，使溶解，補(bǔ)足蒸餾水至1000ml，調(diào)pH至7．2—7．4。加入乳糖，混勻溶解后，0．70kg/cm2 (10磅/英寸2 )，115．2℃滅菌20分鐘。稱取亞硫酸鈉置一無菌空試管中，加入無菌水少許使溶解，再在水浴中煮沸10分鐘后，立刻滴加于20ml5%堿性復(fù)紅乙醇溶液中，直至深紅色褪成淡粉紅色為止。將此亞硫酸鈉與堿性復(fù)紅的混合液全部加至上述已滅菌的并仍保持溶化狀態(tài)的培養(yǎng)基中，充分混勻，倒平皿，放冰箱備用。貯存時間不宜超過2周。 二十四、伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基(EMB培養(yǎng)基) (實(shí)驗(yàn)60，61) 蛋白胨水瓊脂培養(yǎng)基 100ml 20%乳糖溶液 2ml 2%伊紅水溶液 2ml 0．5%美藍(lán)水溶液 1ml 將已滅菌的蛋白胨水瓊脂培養(yǎng)基(pH7．6)加熱溶化，冷卻至60℃左右時，再把已滅菌的乳糖溶液、伊紅水溶液及美藍(lán)水溶液按上述量以無菌操作加入。搖勻后，立即倒平板。乳糖在高溫滅菌易被破壞必須嚴(yán)格控制滅菌溫度，一般是0．70kg/cm2 (10磅/英寸2 )，115．2℃滅菌20分鐘。 二十五、乳糖蛋白胨培養(yǎng)液(“水的細(xì)菌學(xué)檢查”用) (實(shí)驗(yàn)60、61) 蛋白胨 10g 牛肉膏 3g 乳糖 5g NaCl 5g 1．6%溴甲酚紫乙醇溶液 1ml 蒸餾水 1000ml 將蛋白胨、牛肉膏、乳糖及Nacl加熱溶解于1000ml蒸餾水中，調(diào)pH至7．2—7．4。加入1．6%溴甲酚紫乙醇溶液1ml，充分混勻，分裝于有小倒管的試管中。0．70kg/cm2 (10磅/英寸2 )，115．2℃滅菌20分鐘。 |
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