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枚馨言子銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】超大片段連接問題 已有6人參與
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我的是兩個(gè)一萬多bp的載體相連，將這兩個(gè)載體用EcoRI單酶切，然后連接，轉(zhuǎn)化后抗生素的板上，菌落是長滿板的，然后做菌落PCR，一條帶都沒有（我的目的條帶一個(gè)是3000多一個(gè)是5000多），不知道是沒有連進(jìn)去還是PCR片段太大沒有擴(kuò)出條帶來。 望高手能幫忙解答，不勝感激�。。ǜ剑浩渲羞�有一個(gè)問題就是 EcoRI單酶切是將環(huán)狀質(zhì)粒切成一條線性片段，多次酶切后每次跑膠都是酶切后比酶切前跑得快，也就是線性片段比環(huán)狀質(zhì)粒跑的快，不知道是酶切的問題，還是屬于正�，F(xiàn)象） |
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