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[交流]
【求助/交流】有誰用過bioteke的RT-PCR premixture?我怎么連標(biāo)線都做不好呢? 已有2人參與
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RT. 有哪位蟲友用過百泰克的RT-PCR premixture?質(zhì)量怎么樣? 最近我一直用百泰克的2倍SYBR Real-time PCR Premixture做絕對定量的標(biāo)準(zhǔn)曲線.效果很差.梯度稀釋為10^8至10^2基因拷貝數(shù).標(biāo)準(zhǔn)曲線在10^8至10^5次之間標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合的還算可以,R2為0.992,但4次到3次方之間的點(diǎn)就非常差勁了.Ct值基本在16-22之間變動(dòng).幾乎不能檢測更低的拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)品. 別人用我的定量PCR儀都蠻好的,Ct值可以到30多都沒有問題.為什么我的就不行?是不是百泰克的RT-PCR premixture質(zhì)量有問題?導(dǎo)致無法測定較低濃度的模板?還是有其他原因.請各位蟲友幫忙.BB奉送! |
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