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lisf12345銅蟲 (初入文壇)
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【求助】如何配制1%的氯金酸溶液,不是膠體金??? 已有13人參與
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| 各位仁兄,本人新近購買了一瓶氯金酸溶液,實(shí)驗需配制1%的氯金酸溶液,因 試劑太貴重,不敢貿(mào)然動手,請教各位仁兄幫忙給出個主意,看怎么配制最好,謝謝。。。! |
博聞強(qiáng)知 |
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氯金酸(HauC14)是主要還原材料,常用還原劑有檸檬酸鈉、鞣酸、抗壞血酸、白磷、硼氫化鈉等。根據(jù)還原劑類型以及還原作用的強(qiáng)弱,可以制備0.8nm~150nm不等的膠體金。最常用的制備方法為檸檬酸鹽還原法。具體操作方法如下: ● 將HauC14先配制成0.01%水溶液,取100ml加熱至沸。 ● 攪動下準(zhǔn)確加入一定量的1%檸檬酸三鈉(Na3C6H5O7·2H2O)水溶液。 ● 繼續(xù)加熱煮沸15min。此時可觀察到淡黃色的氯金酸水溶液在檸檬酸鈉加入后很快變灰色,續(xù)而轉(zhuǎn)成黑色,隨后逐漸穩(wěn)定成紅色。全過程約2~3min。 ● 冷卻至室溫后用蒸餾水恢復(fù)至原體積。 用此法可制備16~147nm粒徑的膠體金。金顆粒的大小取決于制備時加入的檸檬酸三鈉的量。表19-1列舉制備4種不同粒徑膠體金時檸檬酸三鈉的用量。 表19-1 四種粒徑膠體金的制備及特性 膠體金粒徑(nm) 1%檸檬酸三鈉加入量(ml)* 膠體金特性 呈色 λmax 16 2.00 橙色 518nm 24.5 1.50 橙紅 522nm 41 1.00 紅色 525nm 71.5 0.70 紫色 535nm *還原100ml0.01%HauC14所需量 2.注意事項 ● 氯金酸易潮解,應(yīng)干燥、避光保存。 ● 氯金酸對金屬有強(qiáng)烈的腐蝕性,因此在配制氯金酸水溶液時,不應(yīng)使用金屬藥匙稱量氯金酸。 ● 用于制備膠體金的蒸餾水應(yīng)是雙蒸餾水或三蒸餾水,或者是高質(zhì)量的去離子水。 ● 是以制備膠體金的玻璃容器必須是絕對清潔的,用前應(yīng)先經(jīng)酸洗并用蒸餾水沖凈。最好是經(jīng)硅化處理的,硅化方法可用5%二氯甲硅烷的氯仿溶液浸泡數(shù)分鐘,用蒸餾水沖凈后干燥備用。 ● 膠體金的鑒定和保存:膠體金的制備并不難,但要制好高質(zhì)量的膠體金卻也并非易事。因此對每次制好的膠體金應(yīng)加以檢定,主要檢查指標(biāo)有顆粒大小,粒徑的均一程度及有無凝集顆粒等。 肉眼觀察是最基本也是最簡單和方便的檢定方法,但需要一定的經(jīng)驗。良好的膠體金應(yīng)該是清亮透明的,若制備的膠體金混濁或液體表面有漂浮物,提示此次制備的膠體金有較多的凝集顆粒。在日光下仔細(xì)觀察比較膠體金的顏色,可以粗略估計制得的金顆粒的大小。當(dāng)然也可用分光光度計掃描λmax來估計金顆粒的粒徑。結(jié)制備的膠體金最好作電鏡觀察,并選一些代表性的作顯微攝影,可以比較精確地測定膠體金的平均粒徑。 膠體金在潔凈的玻璃器皿中可較長時間保存,加入少許防腐劑(如0.02%NaN3)可有利于保存。保存不當(dāng)時會有細(xì)菌生長或有凝集顆粒形成。少量凝集顆粒并不影響以后膠體金的標(biāo)記,使用時為提高標(biāo)記效率可先低速離心去除凝集顆粒。 免疫金的特性和制備 |

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