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lovecaowei新蟲 (初入文壇)
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【求助】關(guān)于液相色譜 5個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣 出峰重疊問題？
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 各位高人，請(qǐng)教個(gè)問題 我今天下午做的實(shí)驗(yàn)是測(cè)定5‘-核苷酸 我總共有5個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣，用的混標(biāo)法 流動(dòng)相：是甲醇1：1 （體積）0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液,剛開始是15分鐘甲醇沖洗柱子，然后15分鐘流動(dòng)相沖洗，然后5ul進(jìn)樣 結(jié)果，就在3分鐘左右的時(shí)候出了2個(gè)峰，其余的到20分鐘都沒出峰 之后我又把每個(gè)樣品單獨(dú)跑了一遍，結(jié)果是第一種：出峰時(shí)間是3.615S，第二種是3.598S，第三種是3.625S，第四種是3.576S，第五種是3.616S時(shí)，出峰。 本人新手，我感覺好像是峰都重疊在一起了 請(qǐng)問各位一下，怎么把這5種混標(biāo)時(shí)，出峰分離開來。 多謝�。。�！  |
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2樓2010-10-22 17:26:30
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自己搶沙發(fā)，肯定是重疊在一起啦，改變一下流動(dòng)相，應(yīng)該要有機(jī)相比例高些吧 3樓2010-10-22 17:35:53
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5樓2010-10-23 22:00:52
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鐵甲騎兵(金幣+1):很好的思路。 2010-10-24 07:21:42
鐵甲騎兵(金幣+1):很好的思路。 2010-10-24 07:21:42
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最后我也改流動(dòng)相了，第二次做的時(shí)候我把甲醇跳到10%，磷酸二氫鉀偉90%就出了四個(gè)峰，還是少了一個(gè)峰，然后在13分鐘時(shí)候把甲醇又調(diào)到了50%，這時(shí)候出現(xiàn)了第5個(gè)峰，不知道這種方法，是叫，梯度洗脫嗎？ 本文來自: 小木蟲論壇 http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=2517879&pid=1414909&page=1#pid1414909 還有，你的梯度的方法是要一開始就設(shè)置好的，你好像是13分鐘的時(shí)候改的，這樣子的話，我個(gè)人覺得你將來重復(fù)試驗(yàn)的時(shí)候有點(diǎn)困難�？梢砸婚_始的時(shí)候前幾分梯度洗脫的范圍變化小點(diǎn)，然后后段時(shí)間加大看看 如0-10min 5%甲醇-10%甲醇，10-20分10%-60%看看。當(dāng)然我只是舉個(gè)例子，不知道你的情況了 |
7樓2010-10-23 22:28:20
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