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暗星銀蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】啟動(dòng)子缺失載體的構(gòu)建 已有5人參與
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最近構(gòu)建了啟動(dòng)子的缺失載體，但是轉(zhuǎn)煙草之后GUS染色一直沒(méi)有染出來(lái)，請(qǐng)教各位高手指點(diǎn)一下！ 注：后來(lái)分析序列時(shí)，得知在GUS起始密碼子上有還有一個(gè)ATG（啟動(dòng)子上的），但是并沒(méi)有造成GUS的移碼突變，只是可能會(huì)在GUS蛋白前面添加44個(gè)氨基酸，難道這樣會(huì)造成染色失敗嗎？ |
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5樓2010-10-24 19:15:54
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2樓2010-10-24 10:35:26
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小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
amisking(金幣+2):good！ 2010-10-24 14:17:28
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amisking(金幣+2):good！ 2010-10-24 14:17:28
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GUS活性比較強(qiáng)的，一般融合蛋白對(duì)GUS部分的空間結(jié)構(gòu)影響不大，也會(huì)有活性 而且僅僅有個(gè)ATG是不足以導(dǎo)致表達(dá)的。ATG只是翻譯的起點(diǎn)，ATG之前沒(méi)有起始轉(zhuǎn)錄必須的元件的話(huà)是不能引發(fā)轉(zhuǎn)錄的。mRNA都沒(méi)有，哪來(lái)蛋白？得看ATG之前序列是什么才好分析 |
4樓2010-10-24 13:58:19
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