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0539lyb木蟲 (小有名氣)
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[交流]
分光光度計用法詳解-----工作曲線的繪制及使用方法
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本人是以菜鳥，初學(xué)分析，正自學(xué)分光光度計的使用，看到用分光光度計測定分析比較簡便，準(zhǔn)確。可是我有以下問題請高手回答，因是菜鳥自學(xué)，還望不吝指教（金幣上不封頂，隨時追加）： 1、分析不同物質(zhì)同種元素或者同種物質(zhì)的不同元素，如何選擇波長呢？有沒有相關(guān)的規(guī)律統(tǒng)計（或者有沒有現(xiàn)成的總結(jié)規(guī)律或者表格。主要是測常見合金中的元素含量）？ 2、測定完成樣品吸光度后，必須再測相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度嗎？ 3、完成不同濃度 標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度測定后，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液所測組分標(biāo)準(zhǔn)不同和對應(yīng)的吸光度數(shù)值如何繪制工作曲線啊？不會是手動描點法吧，有沒有相關(guān)的軟件�。� 4、根據(jù)樣品的吸光度數(shù)值和工作曲線如何確定樣品組分元素的含量�。� 5、工作曲線一經(jīng)繪制是否可以永久使用，以后只要測同類樣品不同含量的同種元素，就只需按原來的方法測新樣品的吸光度就可以確定所測元素的含量了呢？ 本文來自: 小木蟲論壇 http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=2547105 |
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0539lyb
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在網(wǎng)上找到了如下的根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線反查給定吸光度的濃度數(shù)值方法： 依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線查詢被測物的濃度，勢必影響測定結(jié)果的準(zhǔn)確性。我們用Excel電子表格中的TREND函數(shù)，將標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度值與對應(yīng)濃度進(jìn)行直線擬合，然后由被測物的吸光度值返回線性回歸擬合線，查詢被測物的濃度，方法簡便，可消除視覺差，提高實驗的準(zhǔn)確性。 方法：打開Excel電子表格，在A1∶A6區(qū)域由低濃度依次輸入標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值；在B1∶B6區(qū)域輸入經(jīng)比色(或比濁)后得到的標(biāo)準(zhǔn)品相應(yīng)A值：存盤以備查詢結(jié)果。點擊工具欄中的函數(shù)鈕(fx)，選取“統(tǒng)計”項中的TREND函數(shù)；點擊“確定”，即出現(xiàn)TREND函數(shù)輸入框。在known-y′s框中輸入“A1∶A6”，在known-x′s中輸入“B1∶B6”；在new-x′s中，輸入被測物的A值，其相應(yīng)的濃度值立即出現(xiàn)在“計算結(jié)果”處。隨著計算機(jī)的普及，Excel電子表格亦被廣泛應(yīng)用于實驗室，因此，用Excel電子表格制作標(biāo)準(zhǔn)曲線及查詢測定結(jié)果準(zhǔn)確、實用。 大家覺得如何，直接在電腦里就可以計算了，不是很好嗎？ 這樣就不比繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線了啊，對么？ |
5樓2010-11-01 19:49:02
tianjm07
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0539lyb(金幣+10, 博學(xué)EPI+1):感謝你的熱心回答，受教了。關(guān)于問題5，在要求不十分嚴(yán)格、相關(guān)樣品組分相似時，能否使用原來的工作曲線��？ 2010-11-01 18:39:57
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1 波長的選擇，主要是憑借經(jīng)驗，當(dāng)然還有數(shù)據(jù)庫 2 一般是先測標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，然后確定樣品配置的濃度，大概在曲線區(qū)間 3 之后用excell作圖法既能完成所有數(shù)據(jù)的求解 4 一般情況都是測一次繪制一次工作曲線，這樣才能知道你的實驗重現(xiàn)性和再現(xiàn)性如何 做分析就不要偷工減料，要嚴(yán)謹(jǐn) |
2樓2010-11-01 13:55:58
擁抱未來
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0539lyb(金幣+10):感謝你的熱心回答，受教了。關(guān)于問題5，在要求不十分嚴(yán)格、相關(guān)樣品組分相似時，能否使用原來的工作曲線啊？ 2010-11-01 18:41:34
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分光光度計包括很多，你說的應(yīng)該是可見光的，比較簡單，用于測定在一定波長范圍內(nèi)對特定波長的光有吸收的離子。 1.因為在可見光范圍內(nèi)能測定的每一種離子都對應(yīng)一特定的波長，嚴(yán)格來說一個完整的論文實驗是要做條件試驗來選擇最佳吸收波長的（即其他條件相同時，選擇具有最大吸收的波長），不過你可以查文獻(xiàn)資料得到一些離子的最佳吸收波長。 2.配置不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，做濃度和吸光度的標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后再測樣品的吸光度，必須得使樣品落在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍內(nèi)，這個也需要做探討性試驗。 3.繪制曲線，手工可以誤差比較大。有繪圖軟件，像origin就挺好�？梢宰詣訑M合線性曲線，得到相關(guān)系數(shù)等信息。 4.直接在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查側(cè)得樣品吸光度所對應(yīng)的濃度，即為樣品的濃度。 5.不可以。因為實驗中影響因素很多，測定的樣品不可能只含一種離子，所以每測一次樣品，就得做一次同等條件下的標(biāo)準(zhǔn)曲線。 |
3樓2010-11-01 17:13:31
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4樓2010-11-01 19:47:28
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6樓2010-11-02 01:24:20
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7樓2010-11-02 08:59:26
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0539lyb(金幣+10):謝謝你的回答，關(guān)于問題2-5，可以用本人5樓所找到的方法嗎，是不是可以省很多步驟�。� 2010-11-02 09:57:56
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第一個問題，可以用待測液進(jìn)行全波長掃描，哪個吸光度高，對應(yīng)的波長就是最佳波長。也可以找數(shù)據(jù)庫。找不到的話就用全波長掃描，來確定波長。 第二個問題，先測不同濃度標(biāo)液的吸光度，做濃度—吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲線，再測出待測液的吸光度，根據(jù)曲線就可以算出待測液的濃度。 第三個問題，用Excel或者origin都行。 第四個問題。繪出圖，再線性回歸一下就得出一個方程，y=ax+b,根據(jù)方程就求出待測液的濃度了。 第五個問題，一般精確度要求不高的可以做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，用好多天。如果精確度要求很高的就要一天做一次標(biāo)準(zhǔn)曲線了。 |
8樓2010-11-02 09:40:16
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9樓2010-11-02 10:05:11
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10樓2010-11-02 10:13:25
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