tuodecai

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[交流] 【求助/交流】體外轉(zhuǎn)錄11kb的片段用哪個公司的試劑比較好？

體外轉(zhuǎn)錄的試劑盒我了解過pomega 和ambion的，關(guān)鍵我要轉(zhuǎn)錄11kb的，不知道哪個公司的有優(yōu)勢，或者還有沒其它公司更好產(chǎn)品，望各位推薦推薦，謝謝！

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1樓 2010-11-07 20:27:03

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plantaqp

金蟲 (正式寫手)

tuodecai(金幣+1):十分感謝！ 2010-11-08 10:11:12

我用過ambiond的不過沒你那么長，我也就1500bp吧，效果不錯。
實驗?zāi)康目赡芤膊灰粯�，我是轉(zhuǎn)錄mRNA注射細(xì)胞表達蛋白，測蛋白活性的。

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2樓2010-11-08 06:26:54

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lsbrc

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tuodecai(金幣+1):謝謝，不過您說的我看了，是反轉(zhuǎn)錄合成cDNA的吧？我要的轉(zhuǎn)錄出RNA的，有點兒差別。 2010-11-08 19:11:54

Invitrogen的SuperScriptIII，價格貴。

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4樓2010-11-08 13:16:58

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plantaqp

金蟲 (正式寫手)

tuodecai(金幣+1):呵呵，摩擦接種確實應(yīng)該多做幾次，謝謝！ 2010-11-09 11:37:43

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Originally posted by tuodecai at 2010-11-08 10:17:46:

你好，請問你是只做體外轉(zhuǎn)錄，然后體內(nèi)表達吧，我也是只是通過體外轉(zhuǎn)錄出一個植物病毒的基因組RNA，然后拿來做摩擦接種植株葉片的。所以我需要的是能轉(zhuǎn)錄出全長的RNA。謝謝!

不管是那一種那轉(zhuǎn)錄出來你的RNA就好。找個好的公司的試劑盒，產(chǎn)品說明書說的能滿足你的需要一般就沒有問題的。
另外摩擦接種的效率有多高？感覺是個技術(shù)活。

[ Last edited by plantaqp on 2010-11-9 at 03:14 ]

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5樓2010-11-09 03:03:23

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thendlee

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小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
tuodecai(金幣+2): 十分感謝！ 2011-11-20 09:59:03

MBI的 transcriptaid T7 HIGH YIELD transcription KIT我轉(zhuǎn)錄的是12KB的帶有T7啟動子的不知道你用的是什么

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6樓2011-11-18 15:48:40

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bbwalkman

木蟲 (小有名氣)

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小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
tuodecai(金幣+1): 謝謝，能否留個聯(lián)系方式向你詳細(xì)咨詢下，望賜教，謝謝！ 2011-11-20 10:12:40

你是只做轉(zhuǎn)錄的話TaKaRa的轉(zhuǎn)錄酶就可以啊，看看你的啟動子是什么，價格適中，效果也可以。。。

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7樓2011-11-18 20:15:08

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tuodecai

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引用回帖:

Originally posted by plantaqp at 2010-11-08 06:26:54:
我用過ambiond的不過沒你那么長，我也就1500bp吧，效果不錯。
實驗?zāi)康目赡芤膊灰粯�，我是轉(zhuǎn)錄mRNA注射細(xì)胞表達蛋白，測蛋白活性的。

你好，請問你是只做體外轉(zhuǎn)錄，然后體內(nèi)表達吧，我也是只是通過體外轉(zhuǎn)錄出一個植物病毒的基因組RNA，然后拿來做摩擦接種植株葉片的。所以我需要的是能轉(zhuǎn)錄出全長的RNA。謝謝!

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3樓2010-11-08 10:17:46

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6樓: Originally posted by thendlee at 2011-11-18 15:48:40:
MBI的 transcriptaid T7 HIGH YIELD transcription KIT我轉(zhuǎn)錄的是12KB的帶有T7啟動子的不知道你用的是什么

我用的是ambion公司的mMESSAGE mMACHINE Kit 用的是T7啟動子的 PCR產(chǎn)物為模板的，轉(zhuǎn)了好幾次都失敗了，不過連對照也不理想，我覺得問題很多，跑普通的瓊脂糖電泳發(fā)現(xiàn)降解較嚴(yán)重，正愁著沒辦法解決，能否留個QQ和電話號碼，我想向你請教下詳細(xì)的操作，請賜教，謝謝！

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8樓2011-11-20 10:08:01

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fuweilin2013

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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖

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8樓: Originally posted by tuodecai at 2011-11-20 10:08:01
我用的是ambion公司的mMESSAGE mMACHINE Kit 用的是T7啟動子的 PCR產(chǎn)物為模板的，轉(zhuǎn)了好幾次都失敗了，不過連對照也不理想，我覺得問題很多，跑普通的瓊脂糖電泳發(fā)現(xiàn)降解較嚴(yán)重，正愁著沒辦法解決，能否留個Q ...

我也在做體外轉(zhuǎn)錄，也失敗了，想請教詳細(xì)操作，謝謝！

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10樓2013-10-27 21:46:20

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doctorzizhen

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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖

最后您成功沒有？選的是哪個公司試劑盒呢？謝謝

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11樓2015-08-14 23:55:39

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tuodecai

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11樓: Originally posted by doctorzizhen at 2015-08-14 23:55:39
最后您成功沒有？選的是哪個公司試劑盒呢？謝謝

我用過ambion和promega兩家公司的。應(yīng)該都可以，不過我是用promega的做出來的。

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12樓2015-08-15 00:14:50

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bbwalkman9樓

2011-11-20 10:32 回復(fù)

小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖

1 [ Last edited by bbwalkman on 2011-11-26 at 11:07 ]

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