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chunmeiyang銀蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
【求助/交流】磷酸鹽緩沖液配制 已有7人參與
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| PBS的一般配方是磷酸二氫鉀(KH2PO4)0.24g，磷酸氫二鈉(Na2HPO4)1.44g，氯化鈉(NaCl)8.0g，氯化鉀(KCl)0.2g，加水至1000mL，如果我改變氯化鈉的含量，其他成分是不是要相應(yīng)改變啊 |
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磷酸緩沖溶液特性：濃度變化10倍，ph值變化小于0.1。根據(jù)這個(gè)特性，可以參考網(wǎng)上的磷酸鹽緩沖溶液配制方法來(lái)配制。 或者配制兩份等摩爾濃度的磷酸氫二鉀和磷酸二氫鉀溶液，邊混合邊測(cè)ph值，直到得到你所需要的。 磷酸鹽緩沖液的配制 磷酸鹽是生物化學(xué)研究中使用最廣泛的一種緩沖劑，由于它們是二級(jí)解離，有二個(gè)pKa 值，所以用它們配制的緩沖液，pH 范圍最寬：NaH2PO4： pKa1＝2.12，pKa2＝7.21； Na2HPO4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32 配酸性緩沖液：用NaH2PO4，pH＝1～4， 配中性緩沖液：用混合的兩種磷酸鹽，pH＝6～8， 配堿性緩沖液：用Na2HPO4，pH＝10～12。 用鉀鹽比鈉鹽好，因?yàn)榈蜏貢r(shí)鈉鹽難溶，鉀鹽易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的緩沖液時(shí)，只能用磷酸鈉而不能用磷酸鉀，因?yàn)镾DS(十二烷基硫酸鈉)會(huì)與鉀鹽生成難溶的十二烷基硫酸鉀。 磷酸鹽緩沖液的優(yōu)點(diǎn)為：①容易配制成各種濃度的緩沖液；②適用的pH 范圍寬；③pH 受溫度的影響��；④緩沖液稀釋后pH 變化小，如稀釋10倍后pH 的變化小于0.1。 其缺點(diǎn)為：①易與常見(jiàn)的鈣Ca2+離子、鎂Mg2+離子以及重金屬離子締合生成沉淀；②會(huì)抑制某些生物化學(xué)過(guò)程，如對(duì)某些酶的催化作用會(huì)產(chǎn)生某種程度的抑制作用. pH 0.2mol/L NaH2PO4(ml) 0.2mol/L Na2HPO4(ml) 5.7 93.5 6.5 5.8 92.0 8.0 5.9 90.0 10.0 6.0 87.7 12.3 6.1 85.0 15.0 6.2 81.5 18.5 6.3 77.5 22.5 6.4 73.5 26.5 6.5 68.5 31.5 6.6 62.5 37.5 6.7 56.5 43.5 6.8 51.0 49.0 6.9 45.0 55.0 7.0 39.0 61.0 7.1 33.0 67.0 7.2 28.0 72.0 7.3 23.0 67.0 7.4 19.0 81.0 7.5 16.0 84.0 7.6 13.0 87.0 7.7 10.5 89.5 7.8 8.5 91.5 7.9 7.0 93.0 8.0 5.3 94.7 Na2HPO4•2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液為85.61克/升。 Na2HPO4•2H2O分子量 = 358.22，0.2 mol/L溶液為71.64克/升。 Na2HPO4•2H2O分子量 = 156.03，0.2 mol/L溶液為31.21克/升. |
7樓2011-09-07 13:16:45
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8樓2014-04-15 09:17:34
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