 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1388 | 回復(fù): 2 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
[交流]
【求助】問一個(gè)很專的問題“免疫熒光雙標(biāo)技術(shù)檢測(cè)海馬突觸素I表達(dá)”檢測(cè)方法 已有2人參與
|
|||
|
在文獻(xiàn)上看到： 將爬有原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元用PBS漂洗后，冰甲醇40℃固定10min；PBS洗片5 min×3次，加入10%羊血清，室溫孵育30min；吸棄羊血清封閉液，加入1:400稀釋的突觸素I，4℃孵育過夜；PBS洗片5 min×3次，滴加l:50稀釋的FITC標(biāo)記的羊抗體IgG，避光室溫孵育2h；避光PBS洗片5min×3次，滴加PBS-甘油稀釋的DAPI，封片。激光共聚焦顯微鏡下觀察，LSCM激光共聚焦熒光斷層掃描成像系統(tǒng)采集圖像，進(jìn)行疊加處理，合成FITC和DAPI共定位的突觸素I圖像。 個(gè)人感覺好像不對(duì)，不知道哪位老師做過這放面的實(shí)驗(yàn)。給指點(diǎn)指點(diǎn)。 另外還有一個(gè) 免疫熒光雙標(biāo)法檢測(cè)海馬神經(jīng)元p-CREB的表達(dá)：常規(guī)操作制備冰凍切片，切片在10%山羊血清封閉液中室溫孵育lh后，同時(shí)加入兩種第一抗體為兔抗p-CREB(1:100)和小鼠抗NeuN(1:100)4℃濕盒孵育過夜，然后加入熒光二抗(羊抗兔IgG-TRITC l:50，羊抗小鼠IgG-FITC 1:50)室溫孵育2 h。每次抗體孵育后均用PBS漂洗，5 min×3次。最后用含有防淬滅劑的甘油/碳酸鹽緩沖液(l:l)封固，熒光顯微鏡進(jìn)行觀察、拍片。病理圖像分析軟件計(jì)算神經(jīng)元染色積分光密度值(IOD值)，IOD值與p-CREB表達(dá)成正比，以IOD值反映p-CREB的表達(dá)。 這個(gè)個(gè)人感覺對(duì)，還請(qǐng)高手確認(rèn)，謝謝。 以上材料是參考一博士論文。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
材料考研調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
材料調(diào)劑
已經(jīng)有12人回復(fù)
-
英一數(shù)一408，總分284，二戰(zhàn)真誠求調(diào)劑
已經(jīng)有14人回復(fù)
-
085410 一志愿211 22408分?jǐn)?shù)359求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
271求調(diào)劑
已經(jīng)有19人回復(fù)
-
385分 生物學(xué)（071000）求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
一志愿安徽大學(xué)計(jì)算機(jī)科學(xué)與技術(shù)學(xué)碩，331分求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
318求調(diào)劑，計(jì)算材料方向
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
291求調(diào)劑
已經(jīng)有25人回復(fù)
-
一志愿北京科技大學(xué)085601材料工程英一數(shù)二初試總分335求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
qinhy
榮譽(yù)版主 (文壇精英)
豬家族—豬小妖
- PhEPI: 1
- 應(yīng)助: 15 (小學(xué)生)
- 貴賓: 9.913
- 金幣: 22896.4
- 散金: 11345
- 紅花: 74
- 沙發(fā): 90
- 帖子: 15334
- 在線: 963.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 709002
- 注冊(cè): 2009-02-26
- 性別: MM
- 專業(yè): 心腦血管藥物藥理
- 管轄: 藥學(xué)
3樓2010-12-19 15:33:26
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿安徽大學(xué)計(jì)算機(jī)科學(xué)與技術(shù)學(xué)碩，331分求調(diào)劑 +3 | 蔣昌鵬qtj 2026-04-01 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 一志愿北京科技，085601總分305求調(diào)劑 +9 | 半生瓜！ 2026-04-01 | 10/500 |
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +21 | 新時(shí)代材料 2026-03-27 | 23/1150 |
|
|
|
[考研] 理學(xué)07化學(xué) 303求調(diào)劑 +12 | 睿08 2026-03-27 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 295材料工程專碩求調(diào)劑 +19 | 1428151015 2026-03-27 | 19/950 |
|
|
|
[考研] 279求調(diào)劑 +7 | 莫xiao 2026-04-01 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 319求調(diào)劑 +9 | 太容易1018 2026-04-01 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 266分，一志愿電氣工程，本科材料，求材料專業(yè)調(diào)劑 +8 | 哇呼哼呼哼 2026-04-01 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 342求調(diào)劑 +12 | Mary Keen 2026-03-28 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +8 | y-yh 2026-04-01 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)0703 調(diào)劑 306分 一志愿211 +12 | 26要上岸 2026-03-28 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +8 | axibli 2026-04-01 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，一志愿 南京航空航天大學(xué) ，080500材料科學(xué)與工程學(xué)碩，總分289分 +10 | @taotao 2026-03-29 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +8 | 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿浙江大學(xué)工科動(dòng)力工程370,數(shù)一121,專業(yè)課135，現(xiàn)在能去哪里 +3 | 080700調(diào)劑 2026-03-30 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 081200-11408-276學(xué)碩求調(diào)劑 +4 | 崔wj 2026-03-31 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 南京大學(xué)化學(xué)調(diào)劑 +11 | 景隨風(fēng) 2026-03-29 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中師范化學(xué)332分求調(diào)劑 +3 | Lyy930824@ 2026-03-29 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +10 | 宋明欣 2026-03-27 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +4 | 柚柚yoyo 2026-03-26 | 4/200 |
|