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【求助】HPLC-ESI-MS聯(lián)用分析條件選擇時需考慮的主要因素有哪些？ 已有3人參與
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| HPLC-ESI-MS聯(lián)用分析條件選擇時需考慮的主要因素有哪些？ |
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tingzai0116
木蟲 (正式寫手)
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- 專業(yè): 藥物分析
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小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖交流
qinhy(金幣+2):多謝指教！歡迎常來藥學(xué)版！ 2010-12-22 19:51:39
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流動相的選擇：優(yōu)先使用低水比例的溶液為流動相 水含量高降低離子化效果。 提高有機相比例可提高離子化效率。 一般正離子方式用甲醇，負(fù)離子方式用乙腈 非揮發(fā)性鹽和離子對試劑與LC/MS不匹配(競爭抑制) 如磷酸鹽、枸櫞酸鹽、硼酸鹽 可選用揮發(fā)性酸、堿和鹽 如醋酸銨、甲酸銨、甲酸、乙酸、氨水等。 為了離子化效果，以上電解質(zhì)濃度宜小。 定性分析時，有時加入NH4+、Li+，幫助判斷母離子。但會使圖譜復(fù)雜。 pH的選擇： C18柱pH適用范圍是 2 ~ 8。 pH值影響離子狀態(tài)，影響生成氣相離子的效率和檢測靈敏度。 測堿性物質(zhì)， pH值在（pKa - 2），正離子檢測 測酸性物質(zhì)， pH值在（pKa + 2），負(fù)離子檢測 實際工作中，負(fù)離子方式檢測酸性物質(zhì)，往往加少量乙酸 （＜0.05 %）可使靈敏度提高 流動相的流速和色譜柱內(nèi)徑的選擇： 流動相流速受柱子內(nèi)徑和流動相組成影響。 較小的流速可獲得較好離子化效率。 盡量選內(nèi)徑小的色譜柱。但是要兼顧分析速度的因素，因此多采用內(nèi)徑2.1mm的色譜柱，0.2~0.4ml/min的流速。 只有粗徑柱，只能大流量時，可用三通分流以滿足MS的流量要求。 流動注射（FIA）比柱分離響應(yīng)強，但混有待測組分外的物質(zhì)。 有些樣品很容易吸附在進(jìn)樣閥和管路中，因此實驗后要對柱子進(jìn)行沖洗（純水—純甲醇） 更詳細(xì)的課參見專門的書籍 |
2樓2010-12-22 13:08:10
3樓2010-12-23 11:07:02
4樓2010-12-27 15:44:39
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