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[交流]
【求助/交流】關(guān)于轉(zhuǎn)化擬南芥的問題 已有6人參與
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我用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的floral dip method轉(zhuǎn)化擬南芥，現(xiàn)在已經(jīng)轉(zhuǎn)化出第一代了，要篩選第二代。 種子消毒處理方法為：70%乙醇1min；后用1倍的次氯酸處理10min。然后，在超菌工作臺(tái)中把種子均勻地涂在MS培養(yǎng)基上。MS培養(yǎng)基加了抗生素Carb，和Kana，因?yàn)檩d體上有kana抗性。 都兩周了，但為什么我篩的種子發(fā)芽了，但不長(zhǎng)根呢？[/color] 謝謝大家！ [ Last edited by guanxn90 on 2010-12-26 at 19:36 ] |
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4樓2010-12-29 21:12:37
擬南芥轉(zhuǎn)化---不長(zhǎng)根
★ ★
dhd997(金幣+2):鼓勵(lì)回帖總結(jié) 2010-12-30 09:01:13
dhd997(金幣+2):鼓勵(lì)回帖總結(jié) 2010-12-30 09:01:13
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謝謝大家的回答。 現(xiàn)在總結(jié)如下：抗生素濃度過高可能會(huì)導(dǎo)致只發(fā)芽不長(zhǎng)根； 消毒液濃度過高； 我的處理是：70%乙醇1min；9倍的次氯酸稀釋成1倍的用+一點(diǎn)吐溫10mins；然后用水洗，懸浮后涂在MS培養(yǎng)基上。 實(shí)驗(yàn)室的師兄說可能是因?yàn)橥窟^平板后，平板太干了，導(dǎo)致根長(zhǎng)不進(jìn)培養(yǎng)基了。 我想如果是有什么原因?qū)е聦?duì)種子有傷害的話，不至于只傷根不傷葉吧？ 謝謝各位。 |
5樓2010-12-29 23:06:20
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