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fiona_新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
【求助/交流】求高手指點(diǎn)！關(guān)于用C43（DE3)表達(dá)膜蛋白 已有4人參與
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基因組信息顯示我的目標(biāo)蛋白為膜蛋白，371aa，稀有密碼子有5個(gè)，不相連，通過(guò)結(jié)構(gòu)分析也證明存在跨膜結(jié)構(gòu)，最初用pET28a作為表達(dá)載體在BL21中表達(dá)，都是包涵體，后來(lái)把宿主換成C43（DE3），超聲破碎后很渾濁，顯微鏡下看細(xì)胞是破碎的，蛋白電泳結(jié)果全都是包涵體，誘導(dǎo)條件也改過(guò)，沒(méi)效果~~ 現(xiàn)在換pGEX-4T-1作表達(dá)載體，也不知道結(jié)果會(huì)怎樣~~ 各位有沒(méi)有遇到過(guò)這么情況，求指點(diǎn)，萬(wàn)分感謝~~ [ Last edited by fiona_ on 2011-1-6 at 15:58 ] |
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曉想
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