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[交流]
欲用熒光法(FRET)研究BSA與豆豉纖溶酶的相互作用,求合適的方案(20金幣)
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本人欲研究BSA和豆豉纖溶酶的相互作用,主要是想求得兩者在tris-HCL緩沖溶液中的結合常數(shù)、結合位點、作用距離等,不行的話求得結合常數(shù)也可以 開始欲用熒光猝滅法,但猝滅法多用于BSA與小分子作用,蛋白質之間的作用不太適用,而且最主要的原因是兩者都含有色氨酸,激發(fā)時都有熒光而形成干擾。 部分文獻報道可用熒光共振能量轉移(FRET)測得兩蛋白質間的作用距離,可選用的外源性熒光是熒光蛋白,有機染料,鑭系染料。選用熒光蛋白的話還要用到質粒重裝,細胞轉染等分子生物學手段,本人是做藥學的,對分子生物學這些技術不懂,老板也不可能允許這么做。那就剩下選用有機染料或是鑭系染料了,這兩者中有沒有適合用于研究蛋白質相互作用的呢? 或者有沒有其他適合的其他方法? 希望能說的具體一些,你看我也寫了一大版! |
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