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[交流]
【求助/交流】一只菜鳥關于細胞培養(yǎng)的若干問題,求助老鳥~~
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1、這個學期新復蘇的U937很多碎片,懇請大家提供一個可行方案,對細胞進行優(yōu)化選擇。急~~~~ 2、剛復蘇不久的K562抱團現(xiàn)象很明顯,已經(jīng)傳至第四代,沒有什么改善,怎么辦??? 3、液氮罐里的液氮液面降至一半高度,很多細胞都暴露在液氮外,持續(xù)了半個月。這種情況會對細胞有什么影響?? 4、配好的L-Gln溶液在室溫下能存放多長時間?? |
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1.復蘇細胞有大量碎片,很有可能是融化時間過久,冰晶對細胞造成傷害,造成細胞破裂,加快細胞融化過程,可以用37度水浴箱,或者雙手快速揉搓,盡量在1分鐘內(nèi)融解細胞。 2.可能是因為此細胞有抱團生長特性,可上ATCC查詢細胞背景特性,如果沒有說明此細胞是抱團生長,可能是傳代時消化吹打不夠,沒有把細胞吹打成一兩個一起的細胞懸液,導致細胞抱團生長。 3.液氮是創(chuàng)造低溫環(huán)境,只要液氮罐密閉夠好,有1/3的液氮也可能保證罐內(nèi)低溫,細胞不會有影響,但是液氮低于1/3最好及時灌液氮,避免溫度升高。 4.Gln易降解,最好現(xiàn)配現(xiàn)用,如果配早了放4度冰箱,過夜的我用過沒出現(xiàn)問題,時間長的話最好重新配制。 |
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