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louisena金蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
【求助/交流】關(guān)于透析袋的問(wèn)題 已有3人參與
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| 請(qǐng)教各位關(guān)于透析袋的問(wèn)題，用MWCO500的透析分子量1100的物質(zhì)，但是透析一天后通過(guò)TLC薄板檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)無(wú)法測(cè)出物質(zhì)，原因在哪？ |
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brightfuture01
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小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖交流
lstt09nk(金幣+3): 感謝交流 2011-02-28 14:02:31
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lstt09nk(金幣+3): 感謝交流 2011-02-28 14:02:31
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透析存在如下問(wèn)題： a 透析袋的選擇，透析袋的截留量是一個(gè)理論值，透析袋的孔洞有大有小，給出的數(shù)值是一個(gè)平均值。在透析時(shí)一般選取的透析袋不超過(guò)目的分子大小的 1/3，超過(guò)之后損失量可能就比較多，導(dǎo)致最后檢測(cè)不到。 b 透析buffer的離子濃度往往比較低，而透析袋內(nèi)的溶液離子濃度高。根據(jù)等滲原理，在透析結(jié)束的時(shí)候，目標(biāo)物往往被稀釋了。所以在透析結(jié)束后，目的物的濃度很有可能降低到檢測(cè)限以下了，尤其是檢測(cè)手段不是很靈敏的情況下。這種情況下，只需將透析袋內(nèi)的東東濃縮一下就OK了。 c 目的物降解，這種情況大多出現(xiàn)在透析蛋白時(shí)不加蛋白酶抑制劑導(dǎo)致目的物被蛋白酶降解。你的透析物有沒(méi)有可能跟其他物質(zhì)反應(yīng)，或者被環(huán)境中存在的酶當(dāng)做底物利用掉？ |
2樓2011-02-28 13:37:54
luquan5918
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3樓2011-02-28 15:13:41
louisena
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4樓2011-03-02 19:47:07
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